表达传染性囊病病毒VP2蛋白的重组T4噬菌体的构建及其应用
公开(公告)号
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CN1554749A
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公开(公告)日
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2004.12.15
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申请(专利)号
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CN200310117515.1
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申请日期
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2003.12.25
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专利名称
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表达传染性囊病病毒VP2蛋白的重组T4噬菌体的构建及其应用
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主分类号
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C12N7/01
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分类号
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C12N7/01;C12N15/40;C12N15/73;A61K39/12
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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华南农业大学
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发明(设计)人
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曹永长;毕英佐;史泉城;马静云
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地址
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510642广东省广州市天河区五山华南农业大学
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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广东;44
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主权项
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含有传染性囊病病毒VP2蛋白的重组T4噬菌体的构建方法,其特征在采用基因重组的方法获得的,其方法是:用EcoRI在37℃分别消化vp2基因的PCR产物和质粒pR,接着在T4连接酶的作用之下,连接消化的vp2的PCR产物和质粒pR,用连接产物转化大肠杆菌DH5α,经Ampr抗性筛选,获得插入了vp2基因的重组子,然后用1对特异性引物SOC-S/VP2-A进行PCR筛选;对PCR筛选阳性的细菌,挑取单菌落接种于3mLLA培养基中,37℃,200r/m振摇培养16-20小时,抽提质粒,再经限制性内切酶消化和序列测定,获得含有传染性囊病病毒vp2基因的重组整合质粒pR-VP2;用重组整合质粒pR-VP2和缺陷性T4噬菌体T4-Z1进行同源重组,获得表达VP2蛋白的重组T4噬菌体。
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摘要
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本发明提供了一个表达鸡传染性囊病病毒结构蛋白VP2的重组T4噬菌体,该重组T4噬菌体具有传染性囊病病毒VP2基因的核苷酸序列和VP2蛋白的氨基酸残基序列。本发明还涉及重组T4噬菌体在传染性囊病疫苗免疫和传染性囊病病毒抗体检测中的应用。
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国际公布
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