多肽的酶表面呈现技术和胆固醇酯转移蛋白C端多肽的酶表面呈现
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公开(公告)号
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CN1548540A
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公开(公告)日
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2004.11.24
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申请(专利)号
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CN03113401.7
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申请日期
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2003.05.09
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专利名称
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多肽的酶表面呈现技术和胆固醇酯转移蛋白C端多肽的酶表面呈现
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主分类号
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C12N15/55
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分类号
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C12N15/55;C12N15/62;C12N9/82;C12N15/12;C12P21/02;A61K38/50;A61K39/00;A61P3/06
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国药科大学
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发明(设计)人
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刘景晶;祁高富;茅丹;吴洁;曹荣月
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地址
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210009江苏省南京市童家巷24号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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江苏;32
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主权项
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一种将多肽呈现在大肠杆菌L-门冬酰氨酶表面的方法，其特征在于通过基因操作将肽段通过一段间隔肽-----源于破伤风毒素的T辅助表位肽段，连接在L-门冬酰氨酶的C端；形成的融合基因可以表达产生具有门冬酰氨酶活性的融合蛋白，多肽被呈现到酶表面，不影响酶自身的折迭。
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摘要
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本发明提供了一种将多肽呈现在大肠杆菌门冬酰氨酶表面的方法，它包括步骤：1〕通过基因操作，将源于破伤风毒素的T辅助表位肽段融合到门冬酰氨酶的C端，形成通用的呈现载体；2〕将待呈现的多肽编码序列DNA连接在上述载体的C端；3〕生成的重组酶能分泌到周质中并保持大部分酶活性，能通过渗透振扰法快速制备；该表面呈现技术能快速呈现抗原多肽，用于发展疫苗和测定抗体的检测试剂。用该呈现技术将人胆固醇酯转移蛋白C端多肽呈现到了酶表面，形成一种新的重组蛋白和相应编码基因，该基因在大肠杆菌中高效表达，重组蛋白保留了85％的酶活性，该重组蛋白的用途是能诱发机体产生抗人胆固醇酯转移蛋白特异抗体，阻断人胆固醇酯转移蛋白的功能，使机体高密度酯蛋白胆固醇含量升高，起到预防动脉粥样硬化和促进动脉粥样硬化消退的作用。
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国际公布
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