公开(公告)号
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CN1546668A
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公开(公告)日
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2004.11.17
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申请(专利)号
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CN200310107316.2
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申请日期
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2003.12.12
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专利名称
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乙型肝炎病毒X蛋白转导系统表达载体及其构建
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主分类号
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C12N15/63
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分类号
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C12N15/63;C12N15/51;C12N15/62;C12Q1/68
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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南开大学
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发明(设计)人
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张晓东;叶丽虹;东楠;王洪辉
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地址
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300071天津市卫津路94号(南开大学生命科学学院分子生物研究所张晓东)
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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天津市学苑有限责任专利代理事务所
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代理人
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解松凡
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国省代码
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天津;12
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主权项
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一种乙型肝炎病毒X蛋白转导系统表达载体,包括:pTAT-GFP载体,其特征是所述pTAT-GFP载体与人乙型肝炎病毒X基因重组,它的核苷酸序列如SEQIDNo.1所述,表达含有HBx的融合蛋白。
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摘要
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本发明公开了一种乙型肝炎病毒X蛋白转导系统表达载体及其构建,是通过人乙肝病毒的X基因与pTAT-GFP载体构建重组质粒pTAT-GFP-X,构建的pTAT-GFP-X重组质粒可表达含有乙型肝炎病毒X蛋白的融合蛋白;经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导可大量表达融合蛋白;可以通过6组氨酸(His6)进行纯化;TAT多肽具有能够穿过细胞膜的结构,利用该功能本发明可以使HBx蛋白导入细胞;本发明将HBx蛋白导入细胞后,可通过GFP检测导入效率和胞内示踪;本发明在进行蛋白转导细胞实验时,可实现HBx蛋白的“定量”导入,本发明可详细地研究乙肝病毒X蛋白的致病作用。
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国际公布
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