公开(公告)号
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CN1545553A
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公开(公告)日
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2004.11.10
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申请(专利)号
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CN02805619.1
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申请日期
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2002.02.01
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专利名称
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生产重组胰蛋白酶的方法
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主分类号
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C12N15/57
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分类号
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C12N15/57;C12N9/76;C12N1/19
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分案原申请号
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优先权
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2001.2.1 EP 01102342.1
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申请(专利权)人
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弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
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发明(设计)人
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R·米勒;S·格莱泽;F·盖佩尔;J-P·塔尔霍费尔;B·雷克塞尔;C·施奈德;M·拉特卡;S·伦宁;H·埃克施泰因;C·吉塞尔
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地址
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瑞士巴塞尔
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颁证日
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国际申请
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PCT/EP2002/001072 2002.2.1
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进入国家日期
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2003.08.27
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专利代理机构
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中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
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代理人
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吴亦华
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国省代码
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瑞士;CH
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主权项
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重组生产胰蛋白酶的方法,该方法包含步骤:a)用重组核酸转化宿主细胞,该核酸编码一种由宿主可分泌的形式的前肽序列中具有肠激酶识别位点的胰蛋白酶原,b)在一定条件下培养宿主细胞,该条件使得重组核酸能够表达且表达产物能够分泌到培养基中,该条件是为了基本防止前肽序列的自身催化性切割而选择的,c)从培养基中分离表达产物,d)切割前肽序列以形成活性胰蛋白酶且e)从活性胰蛋白酶中可选择地分离未切割的胰蛋白酶原分子。
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摘要
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本发明涉及生产来自猪胰的重组胰蛋白酶的方法,该胰蛋白酶在巴斯德毕氏酵母(Pichia pastoris)中是可溶的且分泌到培养基中,其中在pH 3.0-4.0的表达防止了胰蛋白酶原到β胰蛋白酶的活化和β胰蛋白酶由胰蛋白酶自溶为ε胰蛋白酶及由此变为失活的肽。
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国际公布
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WO2002/061064 德 2002.8.8
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