公开(公告)号
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CN1544624A
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公开(公告)日
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2004.11.10
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申请(专利)号
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CN200310105516.4
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申请日期
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2003.11.14
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专利名称
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双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir及其制备方法
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主分类号
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C12N15/09
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分类号
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C12N15/09;C12N15/63;C12N15/11;C12N15/31;C12N15/53;C12N15/79;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/10;A61K48/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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山东大学
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发明(设计)人
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于修平;卞继峰;赵蔚明;耿昭;周亚滨;贾继辉;栾怡;齐眉
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地址
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250012山东省济南市文化西路44号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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济南三达专利事务所
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代理人
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孙君
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国省代码
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山东;37
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主权项
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双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir,其特征在于为双股闭环DNA分子,是一种基因克隆的载体,长度为5.1Kb,用于表达制备基因工程产品和生产DNA疫苗,含有两种启动子,一种是真核细胞启动子HCMVIE启动子,另一种为大肠杆菌硝酸盐还原酶基因启动子nirB,分别在真核细胞和原核细胞中被激活表达相应的蛋白,含有多克隆酶切位点,用以插入外源基因,该载体具有SEQIDNO1所示的序列(a)序列特征:*长度:5144碱基对*类型:核酸,1323A,1185C,1165G,1471T.*链型:双链*拓扑结构:环行(b)分子类型:载体DNA(c)假设:否(d)反义:否tcctgcatcttttaatcaaatcccaagatgtgtataaacgcgccggtatgtacaggaaga60ggtttatactaaactgttacattgcaaacgtggtttcgtgtgccaagtgtgaaaaccgat120gtttaatcaaggctctgacgcatttctacaaccacgactccaagtgtgtgggtgaagtca180tgcatcttttaatcaaatcccaagatgtgtataaaccaccaaactgccaaaaaatgaaaa240ctgtcgacaagctctgtccgtttgctggcaactgcaagggtctcaatcctatttgtaatt300attgaataataaaacaattataaatgtcaaatttgttttttattaacgatacaaaccaaa360cgcaacaagaacatttgtagtattatctataattgaaaacgcgtagttataatcgctgag420gtaatatttaaaatcattttcaaatgattcacagttaatttgcgacaatataattttatt480ttcacataaactagacgccttgtcgtcttcttcttcgtattccttctctttttcattttt540ctcttcataaaaattaacatagttattatcgtatccatatatgtatctatcgtatagagt600aaattttttgttgtcataaatatatatgtcttttttaatggggtgtatagtaccgctgcg660catagtttttctgtaatttacaacagtgctattttctggtagttcttcggagtgtgttgc720tttaattattaaatttatataatcaatgaatttgggatcgtcggttttgtacaatatgtt780gccggcatagtacgcagcttcttctagttcaattacaccattttttagcagcaccggatt840aacataactttccaaaatgttgtacgaaccgttaaacaaaaacagttcacctcccttttc900tatactattgtctgcgagcagttgtttgttgttaaaaataacagccattgtaatgagacg960cacaaactaatatcacaaactggaaatgtctatcaatatatagttgctgatggccggcct1020attaatagtaatcaattacggggtcattagttcatagcccatatatggagttccgcgtta1080cataacttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgt1140caataatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatggg1200tggagtatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtc1260cgccccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatga1320ccttacgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatgc1380tgatgcggttttggcagtacaccaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttc1440caagtctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggact1500ttccaaaatgtcgtaataaccccgccccgttgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggt1560gggaggtctatataagcagacgtcgtttagtgaaccgtcagatcactagatgctttattg1620cggtagtttatcacagttaaattgctaacgccagtctcgaacttaacgtgcagaagttgg1680tcgtgaggcactgggcaggtaagtatcgggccctttgtgcggggggagcggctcggggct1740gtccgcggggggacggctgccttcgggggggacggggcagggcggggttcggcttctggc1800gtgtgaccggcggctctagagcctctgctaaccatgttcatgccttcttctttttcctac1860agctcctgggcaacgtgctggttattgtgctgtctcatcattttggcaaagaattggatc1920ggaccgaggtaaatttgatgtacatcaaatggtaccccttgctgaatcgttaaggtaggc1980ggtagggcccagatcttaatcatccacaggagatataccatggcacaccatcaccaccat2040cactcttctggtaaagaaaccgctgctgcgaaatttgaacgccagcacatggactcgcca2100ccgccttctggtctggtcccccggggcagcgcaggttctggtacgattgatgacgacgac2160aagagtccgggcttctcctcaacgatatctgagctcgtggatccgaattctcagatctcg2220gcgcgcctgcaggtcgacggtaccggttcgaagcttgcggccgcacagctgtatacacgt2280gcaagccagccagaactcgccccggaagaccccgaggatctcgagcaccaccatcaccat2340caccatcactaagtgattaacctcaggtgcaggctgcctatcagaaggtggtggctggtg2400tggccaatgccctggctcacaaataccactgagatcgatctttttccctctgccaaaaat2460tatggggacatcatgaagccccttgagcatctgacttctggctaataaaggaaatttatt2520ttcattgcaatagtgtgttggaattttttgtgtctctcactcggaaggacatatgggagg2580gcaaatcatttaaaacatcagaatgagtatttggtttagagtttggcaacatatgcccat2640atgtaactagcataaccccttggggcctctaaacgggtcttgaggggttttttgctgaaa2700gcatgcggaggaaattctccttgaagtttccctggtgttcaaagtaaaggagtttgcacc2760agacgcacctctgttcactggtccggcgtattaaaacacgatacattgttattagtacat2820ttattaagcgctagattctgtgcgttgttgatttacagacaattgttgtacgtattttaa2880taattcattaaatttataatctttagggtggtatgttagagcgaaaatcaaatgattttc2940agcgtctttatatctgaatttaaatattaaatcctcaatagatttgtaaaataggtttcg3000attagtttcaaacaagggttgtttttccgaaccgatggctggactatctaatggattttc3060gctcaacgccacaaaacttgccaaatcttgtagcagcaatctagctttgtcgatattcgt3120ttgtgttttgttttgtaataaaggttcgacgtcgttcaaaatattatgcgcttttgtatt3180tctttcatcactgtcgttagtgtacaattgactcgacgtaaacacgttaaatagagcttg3240gacatatttaacatcgggcgtgttagctttattaggccgattatcgtcgtcgtcccaacc3300ctcgtcgttagaagtt
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摘要
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双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir及其制备方法,属于DNA疫苗技术领域。双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir为双股闭环DNA分子,是一种基因克隆的载体,长度为5.1Kb,用于表达制备基因工程产品和生产DNA疫苗,含有两种启动子,一种是真核细胞启动子HCMV IE启动子,另一种为大肠杆菌硝酸盐还原酶基因启动子nirB,分别在真核细胞和原核细胞中被激活表达相应的蛋白,含有多克隆酶切位点,用以插入外源基因,该载体具有SEQ ID NO 1所示的序列。本发明的疫苗载体可用于高效表达外源基因,而不需要在培养体系中加入诱导剂。
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国际公布
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