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公开(公告)号
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CN1544466A
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公开(公告)日
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2004.11.10
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申请(专利)号
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CN200310105919.9
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申请日期
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2003.11.13
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专利名称
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高亲和力抗肿瘤坏死因子单克隆抗体的可变区基因及其制备
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主分类号
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C07K14/525
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分类号
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C07K14/525;C07K16/18;C07H21/04;C12P19/34;C12P21/08
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军第四军医大学
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发明(设计)人
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金伯泉;刘雪松;朱参胜;杨琨
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地址
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710032陕西省西安市长乐西路17号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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西安通大专利代理有限责任公司
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代理人
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李郑建
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国省代码
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陕西;61
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主权项
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一种高亲和力抗肿瘤坏死因子单克隆抗体的可变区基因，其特征在于，包括F6VL和F6VH基因序列和氨基酸序列分别为：F6VL基因序列和氨基酸序列包括CDR1、CDR2和CDR3核苷酸序列和氨基酸序列如下：10ctgacccagtctccatcctccctggctatgtcagtaggacagaagLTQSPSSLAMSVGQK55gtcactatgaactgcaagtccagtcagagccttttaaatagttacVTMNCKSSQSLLNSY100actcagaagaactatttggcctggtaccagcagaaaccaggacagTQKNYLAWYQQKPGQ145tctcctaaacttctggtatactttgcatccactagggagtctgggSPKLLVYFASTRESG190gtccctgatcgcttcatgggcagtggatctgggacagatttcactVPDRFMGSGSGTDFT235cttaccatcagcagtgtgcagactgaagacctggcagattacttcLTISSVQTEDLADYF280tgtcagcaacattataggattccattcacgttcggctcggggaccCQQHYRIPFTFGSGT325aagctggagatctaa339KLEI*CDR1：aagtccagtcagagccttttaaatagttacactcagaagaactatttggccKSSQSLLNSYTQKNYLACDR2：tttgcatccactagggagtctFASTRESCDR3：cagcaacattataggattccattcacgQQHYRIPFTF6VH基因序列和氨基酸序列包括CDR1、CDR2和CDR3核苷酸序列和氨基酸序列如下：9ctgcaggagtcaggacctggcctcgtgaaaccttctcagtctctgLQESGPGLVKPSQSL54tctctcacctgctctgtctctggctactccatcaccagtggttatSLTCSVSGYSITSGY99ttctggaactggatccggcagttttcaggaaacaaattggaatggFWNWIRQFSGNKLEW144atgggctacataagctacgacggtagcaataactacaacccatctMGYISYDGSNNYNPS189ctcaaaaatcgaatctccatcactcgtgacacatctaagaaccagLKNRISITRDTSKNQ234tttttcctgaagttgaattctgtgactcctgaggacacagctacaFFLKLNSVTPEDTAT279tattactgtgcaagagatggtgactactactttgactactggggcYYCARDGDYYFDYWG324caagggaccacggtcaccgtctcctca350QGTTVTVSSCDR1：agtggttatttctggaacSGYFWNCDR2：tacataagctacgacggtagcaataactacaacccatctGtcaaaaatYISYDGSNNYNPSLKNCDR3：gatggtgactactactttgactacDGDYYFDY
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摘要
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本发明公开了一种高亲和力抗肿瘤坏死因子(TNF)单克隆抗体(F6 mAb)的可变区基因的制备方法。用重组人TNF免疫BALB/c小鼠，制备一组小鼠抗人TNF单克隆抗体。应用间接ELISA方法筛选出高亲和力的F6 mAb。体外阻断实验证实，F6 mAb具有较高中和活性。克隆该单克隆抗体轻链和重链可变区基因，获得该单克隆抗体轻链和重链可变区基因序列和氨基酸序列，确认该基因序列和蛋白序列的唯一性。编码该可变区的基因序列在构建对炎症、自身免疫性疾病等有治疗作用的嵌合抗体和人源化抗体等方面有巨大的潜在价值。高亲和力F6 mAb可制备测定体液中TNF的ELISA试剂盒，在炎症、自身免疫性疾病的诊断方面有广泛的应用价值。另外，高亲和力F6 mAb可用于制备纯化重组TNF的亲和层析柱。
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国际公布
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