公开(公告)号 | CN1544636A |
公开(公告)日 | 2004.11.10 |
申请(专利)号 | CN200310106354.6 |
申请日期 | 2003.11.19 |
专利名称 | 抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法 |
主分类号 | C12N15/53 |
分类号 | C12N15/53;C12P21/08;G01N33/577 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 东南大学 |
发明(设计)人 | 谢维;金俊飞;张建琼;单军 |
地址 | 210096江苏省南京市四牌楼2号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 南京经纬专利商标代理有限公司 |
代理人 | 沈廉 |
国省代码 | 江苏;32 |
主权项 | 一种抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备方法,其特征在于采用基因重组的方法表达醛糖还原酶相似蛋白-谷胱甘肽转移酶(ARL-GST)重组蛋白并将其纯化;将醛糖还原酶相似蛋白-谷胱甘肽转移酶(ARL-GST)免疫小鼠制备脾细胞悬液,在聚乙二醇(PEG)作用下与处于对数生长期的Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过杂交瘤抗体检测与数次克隆,得到稳定分泌抗ARL-1单克隆抗体的一株细胞。 |
摘要 | 抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法,属于生物工程开发新型肝癌诊断试剂的技术领域。其制备的方法是采用基因重组的方法表达、纯化ARL-GST重组蛋白,将ARL-GST免疫小鼠制备脾细胞悬液,在聚乙二醇作用下与处于对数生长期的Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过杂交瘤抗体检测与数次克隆,得到稳定分泌抗ARL-1单克隆抗体的一株细胞,命名为F9。经测定F9分泌的抗ARL-1单克隆抗体属IgG2b亚型,轻链为κ型,其腹水效价为1∶4×10-5。经鉴定F9分泌的单克隆抗体只对ARL-1蛋白反应,而对与ARL-1蛋白具有较高同源性的醛糖还原酶都不起作用,说明上述单克隆抗体是特异性抗ARL-1蛋白的。 |
国际公布 |