| 公开(公告)号 | CN1173038C |
| 公开(公告)日 | 2004.10.27 |
| 申请(专利)号 | CN03112934.X |
| 申请日期 | 2003.03.10 |
| 专利名称 | 重组人二连体干细胞因子及其制备 |
| 主分类号 | C12N15/62 |
| 分类号 | C12N15/62;C12N15/85;C07H21/04;C12P21/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 南京大学 |
| 发明(设计)人 | 秦浚川;韩俊海;臧宇辉;朱洁 |
| 地址 | 210093 江苏省南京市汉口路22号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 南京知识律师事务所 |
| 代理人 | 胡锡瑜 |
| 国省代码 | 江苏;32 |
| 主权项 | 一种重组人二连体干细胞因子融合蛋白基因，其特征是设计并构建一个含可溶性人干细胞因子1-165位氨基酸的编码区，12个氨基酸GGGGSGGGGSGG柔性连接肽编码区与另一个可溶性人干细胞因子1-145位氨基酸的编码区及终止密码依次头尾共价连接的DNA片段，重组人二连体干细胞因子融合蛋白基因的核苷酸序列为：gaagggatct gcaggaatcg tgtgactaat aatgtaaaag acgtcactaa attggtggca 60aatcttccaa aagactacat gataaccctc aaatatgtcc ccgggatgga tgttttgcca 120agtcattgtt ggataagcga gatggtagta caattgtcag acagcttgac tgatcttctg 180gacaagtttt caaatatttc tgaaggcttg agtaattatt ccatcataga caaacttgtg 240aatatagtgg atgaccttgt ggagtgcgtg aaagaaaact catctaagga tctaaaaaaa 300tcattcaaga gcccagaacc caggctcttt actcctgaag aattctttag aatttttaat 360agatccattg atgccttcaa ggactttgta gtggcatctg aaactagtga ttgtgtggtt 420tcttcaacat taagtcctga gaaagattcc agagtcagtg tcacaaaacc atttatgtta 480ccccctgttg cagccggagg aggaggatcc ggaggaggag gctccggcgg cgaagggatc 540tgcaggaatc gtgtgactaa taatgtaaaa gacgtcacta aattggtggc aaatcttcca 600aaagactaca tgataaccct caaatatgtc cccgggatgg atgttttgcc aagtcattgt 660tggataagcg agatggtagt acaattgtca gacagcttga ctgatcttct ggacaagttt 720tcaaatattt ctgaaggctt gagtaattat tccatcatag acaaacttgt gaatatagtg 780gatgaccttg tggagtgcgt gaaagaaaac tcatctaagg atctaaaaaa atcattcaag 840agcccagaac ccaggctctt tactcctgaa gaattcttta gaatttttaa tagatccatt 900gatgccttca aggactttgt agtggcatct gaaactagtg attgtgtggt ttcttcaaca 960ttaagttagt aa相应的氨基酸序列为：Glu Gly Ile Cys Arg Asn Arg Val Thr Asn Asn Val Lys Asp Val Thr Lys Leu Val Ala5 10 15 20Asn Leu Pro Lys Asp Tyr Met Ile Thr Leu Lys Tyr Val Pro Gly Met Asp Val Leu Pro25 30 35 40Ser His Cys Trp Ile Ser Glu Met Val Val Gln Leu Ser Asp Ser Leu Thr Asp Leu Leu45 50 55 60Asp Lys Phe Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Val65 70 75 80Asn Ile Val Asp Asp Leu Val Glu Cys Val Lys Glu Asn Ser Ser Lys Asp Leu Lys Lys85 90 95 100Ser Phe Lys Ser Pro Glu Pro Arg Leu Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Arg Ile Phe Asn105 110 115 120Arg Ser Ile Asp Ala Phe Lys Asp Phe Val Val Ala Ser Glu Thr Ser Asp Cys Val Val125 130 135 140Ser Ser Thr Leu Ser Pro Glu Lys Asp Scr Arg Val Ser Val Thr Lys Pro Phe Met Leu145 150 155 160Pro Pro Val Ala AlaGlu Gly Ile165 170 175 180Cys Arg Asn Arg Val Thr Asn Asn Val Lys Asp Val Thr Lys Leu Val Ala Asn Leu Pro185 190 195 200Lys Asp Tyr Met Ile Thr Leu Lys Tyr Val Pro Gly Met Asp Val Leu Pro Ser His Cys205 210 215 220Trp Ile Ser Glu Met Val Val Gln Leu Ser Asp Ser Leu Thr Asp Leu Leu Asp Lys Phe225 230 235 240Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Val Asn Ile Val245 250 255 260Asp Asp Leu Val Glu Cys Val Lys Glu Asn Ser Ser Lys Asp Leu Lys Lys Ser Phe Lys265 270 275 280Ser Pro Glu Pro Arg Leu Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Arg Ile Phe Asn Arg Ser Ile285 290 295 300Asp Ala Phe Lys Asp Phe Val Val Ala Ser Glu Thr Ser Asp Cys Val Val Ser Ser Thr305 310 315 320Leu Ser |
| 摘要 | 本发明属于生物技术中的基因工程制备多肽药物技术领域。其目的是构建一种新型融合型二连体干细胞因子基因，并在昆虫细胞中高效分泌表达和制备生物活性更高副作用更小的重组人二连体干细胞因子(rhdSCF)。rhdSCF基因为依次含有人SCF第1-165位氨基酸密码子，12个氨基酸连接肽和人SCF第1-145位密码子及终止密码的DNA片段。从Sf9细胞贴壁或悬浮培养液中制备的rhdSCF精品比活为2.8-2.9×106单位/毫克。比E.coli生产的单体rhSCF精品比活高约6倍。它可用于放疗、化疗及骨髓移植后病人促进造血功能和免疫功能的重建和恢复，也可用于干细胞的体外扩增研究。 |
| 国际公布 |
