公开(公告)号
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CN1171991C
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公开(公告)日
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2004.10.20
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申请(专利)号
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CN02134313.6
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申请日期
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2002.07.08
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专利名称
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人神经干细胞的培养方法
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主分类号
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C12N5/00
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分类号
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C12N5/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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徐如祥;姜晓丹
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发明(设计)人
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徐如祥;姜晓丹
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地址
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510282 广东省广州市工业大道253号珠江医院神经外科
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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广州知友专利代理有限公司
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代理人
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宣国华
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种人神经干细胞的培养方法,其特征在于由以下步骤组成:(1)配制人神经干细胞培养基,该培养基的配制步骤为:a、取DMEM和F12按1∶1混合而成的基础培养液,加纯净水至浓度为10~25g/L,并充分搅拌溶解,制得细胞的一般基础培养液;b、再取胰岛素、L-谷氨酰胺、盐酸丁二胺、硒化钠、人转铁蛋白、氢化可的松、黄体酮依次加入基础培养液中,充分搅拌均匀;c、以1~10当量浓度的氢氧化钠调pH为7.4~8.0;d、层流细胞培养室抽滤消毒,4℃储存备用;(2)取步骤1配制出的人神经干细胞培养基,取新鲜血清加入培养基中,血清的含量为培养基的5~20%;将加入血清的培养基置于培养箱,在35℃~38℃、加3~7%的CO2温箱孵育11~21天。
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摘要
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本发明公开了一种人神经干细胞的培养方法,包括以下步骤:1、配制由DMEM和F12以1∶1混合而成的基础培养液、胰岛素、盐酸丁二胺、硒化钠、氢化可的松、L-谷氨酰胺、人转铁蛋白和黄体酮组成的人神经干细胞培养基;2、即时采集病员本人自体血清;3、将采集的病员本人自体血清加入配制出的人神经干细胞培养基中,在35℃~38℃、加3~7%的CO2温箱孵育。本发明方法简单,可重复性强,操作简便易行;为有关神经干细胞及其应用的科研、教学、临床应用等能起到不可估量的作用,同时也孕育着巨大的社会效益和经济效益。
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国际公布
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