成年人骨髓间充质干细胞体外扩增和定向诱导分化为心肌样细胞的方法
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公开(公告)号
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CN1536076A
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公开(公告)日
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2004.10.13
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申请(专利)号
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CN03109287.X
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申请日期
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2003.04.09
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专利名称
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成年人骨髓间充质干细胞体外扩增和定向诱导分化为心肌样细胞的方法
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主分类号
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C12N5/08
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分类号
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C12N5/08
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所
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发明(设计)人
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裴雪涛;牛丽丽;曹丰;贾国良;祝善俊
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地址
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100850北京市海淀区太平路27号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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北京;11
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主权项
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一种分离扩增培养成年人骨髓间充质干细胞(Mesenchymalstemcells，MSCs)的方法，其特征在于利用干细胞生理特性，采用DMEM-F12+10％胎牛血清作为基本培养基，通过及时、反复传代对人MSCs进行纯化和扩增培养，从而获得高纯度大量MSCs的目的。
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摘要
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本发明的目的是提供一种将人骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)大量扩增后体外定向诱导分化为心肌样细胞的方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：1)利用MSCs的生物学特性，采用密度梯度离心法分离富集人MSCs，利用干细胞的自我更新和增殖特性对干细胞进行扩增，从而达到获得大量干细胞的目的。2)分离出的细胞在体外进行定向诱导分化的方案，其特征在于特定培养代数(第2-6，11代细胞)进行诱导，以特定的化学诱导剂5-氮胞苷(5-AZA)，特定浓度(5-10μM)进行定向诱导；3)分离出的细胞在体外进行定向诱导分化的方案，其特征还在于bFGF促细胞增殖及促进肌细胞表型表达功能与5-AZA的去甲基化作用结合，更有助于人MSCs向成心肌细胞定向分化。本发明提供了心肌细胞损伤缺失后的补充来源，为干细胞移植替代临床治疗心肌梗死及晚期心功能不全等奠定了基础，并为心肌梗死及晚期心功能不全等心肌疾病的药物筛选提供了一个新的模型。
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国际公布
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