| 公开(公告)号 | CN1169836C |
| 公开(公告)日 | 2004.10.06 |
| 申请(专利)号 | CN02115705.7 |
| 申请日期 | 2002.04.11 |
| 专利名称 | 液-固萃取体系分离纯化血红蛋白的方法 |
| 主分类号 | C07K14/805 |
| 分类号 | C07K14/805;C07K1/14 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中南民族大学 |
| 发明(设计)人 | 李步海;孙小梅;沈静茹;雷灼霖 |
| 地址 | 430074 湖北省武汉市民院路5号中南民族大学科研处 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 武汉开元专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 王和平 |
| 国省代码 | 湖北;42 |
| 主权项 | 一种液-固萃取体系分离纯化血红蛋白的方法，包括如下步骤：(1)、在具塞比色管中，加入硫酸铵或磷酸钾，pH控制在3.0～9.0，加入成相聚合物吐温80溶液和聚乙二醇(PEG)8000或聚乙二醇(PEG)6000与亚胺基二乙酸(IDA)组成的修饰物溶液，然后加入血样，用二次水定容，置于康氏电动震荡机上，平置振荡2-10分钟，取下倒置10-20分钟，体系分成聚合物固相和盐水液相，血红蛋白被萃入固相；(2)、在上述固相加二次水溶解后，加入乙二胺四乙酸和硫酸铵或磷酸钾，置于康氏电动震荡机上，平置振荡2-10分钟，取下倒置10-20分钟，体系分成聚合物固相和盐水液相，血红蛋白被反萃入液相；(3)、将上述萃入液相的血红蛋白置于透析袋中进行透析，小分子的盐、少量聚合物可以通过透析袋，而留在透析袋中血红蛋白大分子，其纯度可达到99％以上。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种用液-固萃取体系从血液中分离纯化血红蛋白的方法。本发明方法所需设备简单，分离纯化成本低，速度快，成相容易，成相后直接倾出液相即可使液固两相分离，无须双水相萃取中的离心等操作，不用有机溶剂，无毒性，成相聚合物及盐对蛋白质有稳定和保护作用。萃取分离选择性好，萃取容量大，是易于规模放大分离纯化血红蛋白的新技术。本发明用PEG修饰物混合聚合物-盐-水液-固萃取体系对猪血、牛血、人血中血红蛋白进行萃取，经过一次萃取，一次反萃和透析即可得到纯度大于99％的血红蛋白的水溶液。 |
| 国际公布 |
