公开(公告)号 | CN1166684C |
公开(公告)日 | 2004.09.15 |
申请(专利)号 | CN02150919.0 |
申请日期 | 2002.11.28 |
专利名称 | 制备强荧光藻蓝蛋白的方法 |
主分类号 | C07K14/405 |
分类号 | C07K14/405;C07K1/14 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 浙江大学 |
发明(设计)人 | 龚兴国;曾冬云;徐飞虎;周远 |
地址 | 310027 浙江省杭州市西湖区玉古路20号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 |
代理人 | 韩介梅 |
国省代码 | 浙江;33 |
主权项 | 制备强荧光藻蓝蛋白的方法,其特征是控制温度在0~4℃下,包括以下步骤:1)新鲜藻泥加入pH值7.0-7.6、浓度50mmol/L、含0.1~0.5mmol/LEDTA的磷酸缓冲液,冰浴超声波破,将破碎液离心后去沉淀,收集上清液; |
摘要 | 本发明制备强荧光藻蓝蛋白的方法是以新鲜藻泥为原料,用含EDTA的磷酸缓冲液洗涤,经超声波破碎细胞,释放出色素蛋白,通过离心分离,去除不溶性细胞膜及细胞器。收集上清液,经分级盐析,收集藻蓝蛋白沉淀。沉淀溶于含EDTA的磷酸缓冲液中,通过Sephadex G-25脱盐,上DEAE-Sepharose FF柱,去掉碱性杂质蛋白,然后上羟基磷灰石柱,获得藻蓝蛋白洗脱液。接着上CM-Sepharose FF柱,去掉酸性杂质蛋白。最后再上第二次羟基磷灰石,获得高纯度强荧光的藻蓝蛋白。本发明既省力又省时,适合工业化大规模生产。 |
国际公布 |