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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法

公开(公告)号 CN1526829A  
公开(公告)日 2004.09.08  
申请(专利)号 CN03113853.5  
申请日期 2003.03.04  
专利名称 病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法  
主分类号 C12Q1/68  
分类号 C12Q1/68;C12Q1/04  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中国人民解放军基因工程研究所  
发明(设计)人 马文丽;郑文岭;石嵘  
地址 510515广东省广州市同和第一军医大学分子生物学研究所  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 广州知友专利代理有限公司  
代理人 邵毓琴  
国省代码 广东;44  
主权项 病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法,包括以下步骤:(1)玻片的准备;(2)探针准备:采用PCR扩增病原体全基因组的各个基因和特异性片段,探针长度从数百到数千碱基不等,浓度在0.25~0.5μg/μL;(3)芯片制备:采用基因芯片点样仪进行点样;(4)打印后处理;(5)样品的处理:在PCR扩增过程中,Cy5-dUTP进行掺入标记,在标记前或标记后引入限制性酶切,使获得片段长度在200~600bps之间;(6)杂交:2×杂交缓冲液的配方为60%甲酰胺、12×SSC、0.24%SDS;(7)杂交后清洗;(8)扫描检测。  
摘要 本发明公开了一种病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法,包括以下步骤:(1)玻片的准备;(2)探针准备:采用PCR扩增病原体全基因组的各个基因和特异性片段,探针长度从数百到数千碱基不等,浓度在0.25~0.5μg/μL;(3)芯片制备:采用基因芯片点样仪进行点样;(4)打印后处理;(5)样品的处理:在PCR扩增过程中,Cy5-dUTP进行掺入标记,在标记前或标记后引入限制性酶切,使获得片段长度在200~600bps之间;(6)杂交:2×杂交明冲液的配方为60%甲酰胺、12×SSC、0.24%SDS;(7)杂交后清洗;(8)扫描检测。本发明具有标记效率高、杂交检测结果稳定、杂交时间大大病短等优点,可将杂交时间从传统的16~20小时缩短到10分钟,尤其适用于临床感染性疾病的诊断。  
国际公布  
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