公开(公告)号 | CN1162448C |
公开(公告)日 | 2004.08.18 |
申请(专利)号 | CN00122057.8 |
申请日期 | 2000.08.14 |
专利名称 | 用凝胶层析从发酵液中提取重组人表皮生长因子的方法 |
主分类号 | C07K14/575 |
分类号 | C07K14/575;C07K1/16 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 浙江大学 |
发明(设计)人 | 姚善泾;朱自强;童望宇;梅乐和 |
地址 | 310027 浙江省杭州市玉古路20号 |
颁证日 | 2004.08.18 |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 |
代理人 | 张法高 |
国省代码 | 浙江;33 |
主权项 | 一种用凝胶层析从发酵液中提取重组人表皮生长因子的方法,其特征在于它的提取步骤如下:1)发酵液预制备取除去菌体的发酵上清液1000ml,发酵液中人表皮生长因子浓度为100~300mg/l,加入350~450g硫酸铵,搅拌至溶解,0~4℃下静置4~24小时,至沉淀彻底,人表皮生长因子进入沉淀中,虹吸去除700~850ml上清液,剩余的150~300ml经过10000rpm、30min离心,用50ml蒸馏水或0.02M磷酸缓冲液搅拌溶解沉淀,形成悬浊液,0~4℃下静置4~24小时,待溶解充分后,经过10000rpm、30min离心,收集上清液,人表皮生长因子进入上清液中; |
摘要 | 本发明公开了一种用凝胶层析从发酵液中提取重组人表皮生长因子的方法。它的提取步骤如下,发酵液预制备:取除去菌体的发酵上清液,经盐析、溶解、离心,人表皮生长因子进入上清液中;人表皮生长因子的凝胶分离:用层析系统将上清液加到凝胶层析柱中,然后洗脱直至出峰完毕,收集洗脱液;人表皮生长因子的冷冻升华干燥:将收集液于-40℃下冷冻升华干燥,即可。本发明具有过程集成、工艺简单、生产周期短、操作方便、成本低、条件温和与见效快等优点。 |
国际公布 |