一种从谷氨酰胺转胺酶发酵液中提取谷氨酰胺转胺酶的方法
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公开(公告)号
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CN1160455C
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公开(公告)日
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2004.08.04
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申请(专利)号
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CN02148526.7
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申请日期
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2002.12.10
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专利名称
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一种从谷氨酰胺转胺酶发酵液中提取谷氨酰胺转胺酶的方法
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主分类号
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C12N9/10
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分类号
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C12N9/10;C07K1/36
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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江南大学
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发明(设计)人
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陈坚;堵国成;燕国梁;伦世仪
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地址
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214036 江苏省无锡市惠河路170号
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颁证日
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2004.08.04
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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无锡市大为专利事务所
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代理人
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时旭丹
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国省代码
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江苏;32
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主权项
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一种从谷氨酰胺转胺酶发酵液中提取谷氨酰胺转胺酶的方法，其特征是发酵液经压滤、超滤浓缩、溶剂沉析、离心分离、真空干燥、成品包装而制得成品谷氨酰胺转胺酶，在溶剂沉析、真空干燥、成品包装前加入大豆蛋白或酪蛋白和复合磷酸盐辅料参与工艺进行；压滤：将谷氨酰胺转胺酶发酵液进行板框压滤；超滤浓缩：将压滤得到的滤液通过超滤膜进行超滤浓缩，膜截留分子量为10,000，控制酶液温度不超过10℃；溶剂沉析：将得到的超滤浓缩液加1％(w/w)辅料，充分搅拌，缓慢加入1.5～2倍(v/v)于浓缩液体积的溶剂进行沉析，温度不超过10℃；离心分离：对上清液回收再利用有机溶剂，沉淀物即为酶泥；真空干燥：按酶泥的1％(w/w)加入辅料，然后进行真空干燥；成品包装：将粗酶粉碎，按需要添加辅料至成品酶制剂活力为50～100u/g，抽真空包装得到成品，不超过10℃保存。
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摘要
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一种从谷氨酰胺转胺酶发酵液中提取谷氨酰胺转胺酶的方法，特别是用有机溶剂沉析的方法，属于微生物发酵法制备谷氨酰胺转胺酶技术领域。本发明解决了发酵液不需经过离子交换处理，易于工业化生产的技术问题。本发明中，发酵液经压滤、超滤浓缩、溶剂沉析、离心分离、真空干燥、成品包装而制得成品谷氨酰胺转胺酶，在溶剂沉析、真空干燥、成品包装前加入辅料参与工艺进行。添加辅料对于提高酶活收率有显著效果。压滤后收集滤渣菌体，机械破碎，加适量清水配成酶液后，以相同的方法单独重复进行提取，以提高酶的提取率。本发明的优点是工艺合理、设备简单、操作方便、成本低廉，易于实现工业化生产。
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国际公布
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