公开(公告)号 | CN1159456C |
公开(公告)日 | 2004.07.28 |
申请(专利)号 | CN00116541.0 |
申请日期 | 2000.06.15 |
专利名称 | 筛选基因变异和蛋白质结合的DNA片段的方法 |
主分类号 | C12Q1/68 |
分类号 | C12Q1/68;C12N15/10 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 上海交通大学 |
发明(设计)人 | 刘建华;林志新;王庆康;刘燕刚 |
地址 | 200030 上海市华山路1954号 |
颁证日 | 2004.07.28 |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海交达专利事务所 |
代理人 | 王锡麟 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种筛选基因变异和蛋白质结合的DNA片段的方法,主要包括制备DNA片段的方法,检测与蛋白质结合的DNA片段的方法和鉴定基因变异的方法,其特征在于检测蛋白质结合DNA片段的方法如下:基因组DNA用限制性内切酶酶切或用特异性的引物进行的PCR扩增制备出包含整个基因组的DNA片段,用特异性基团修饰这些DNA片段的末端,使之能够与相应的固相载体表面进行共价交联,用微阵列点样设备将各种DNA片段点样于固相载体表面并共价交联之,制备成DNA芯片,用这种DNA芯片筛选蛋白质结合的DNA片段的方法是(a)将DNA芯片直接与荧光标记的蛋白质保温,芯片的荧光信号位点表示蛋白质所结合的DNA片段;或(b)将DNA片段直接与蛋白质保温,然后用DNase酶切,用同位素或荧光基团标记被保护的DNA片段,最后与DNA芯片杂交;或者将被保护的DNA片段直接与DNA芯片杂交,再用DNA连接酶或RNA连接酶或DNA聚合酶酶促反应标记与芯片杂交的DNA片段,芯片上的同位素信号或荧光信号表示与蛋白质结合的DNA片段。 |
摘要 | 本发明主要包括制备DNA片段、检测与蛋白质结合的DNA片段和鉴定基因变异的方法。检测蛋白质结合DNA片段的方法:基因组DNA用内切酶酶切或用引物进行的PCR扩增制备出片段,用基团修饰这些DNA片段的末端,使与相应的固相载体表面进行共价交联,用微阵列点样设备将各种DNA片段点样于固相载体表面并共价交联之,制备成DNA芯片,用这种DNA芯片筛选蛋白质结合的DNA片段的方法。 |
国际公布 |