| 公开(公告)号 | CN1159456C |
| 公开(公告)日 | 2004.07.28 |
| 申请(专利)号 | CN00116541.0 |
| 申请日期 | 2000.06.15 |
| 专利名称 | 筛选基因变异和蛋白质结合的DNA片段的方法 |
| 主分类号 | C12Q1/68 |
| 分类号 | C12Q1/68;C12N15/10 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 上海交通大学 |
| 发明(设计)人 | 刘建华;林志新;王庆康;刘燕刚 |
| 地址 | 200030 上海市华山路1954号 |
| 颁证日 | 2004.07.28 |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海交达专利事务所 |
| 代理人 | 王锡麟 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种筛选基因变异和蛋白质结合的DNA片段的方法，主要包括制备DNA片段的方法，检测与蛋白质结合的DNA片段的方法和鉴定基因变异的方法，其特征在于检测蛋白质结合DNA片段的方法如下：基因组DNA用限制性内切酶酶切或用特异性的引物进行的PCR扩增制备出包含整个基因组的DNA片段，用特异性基团修饰这些DNA片段的末端，使之能够与相应的固相载体表面进行共价交联，用微阵列点样设备将各种DNA片段点样于固相载体表面并共价交联之，制备成DNA芯片，用这种DNA芯片筛选蛋白质结合的DNA片段的方法是(a)将DNA芯片直接与荧光标记的蛋白质保温，芯片的荧光信号位点表示蛋白质所结合的DNA片段；或(b)将DNA片段直接与蛋白质保温，然后用DNase酶切，用同位素或荧光基团标记被保护的DNA片段，最后与DNA芯片杂交；或者将被保护的DNA片段直接与DNA芯片杂交，再用DNA连接酶或RNA连接酶或DNA聚合酶酶促反应标记与芯片杂交的DNA片段，芯片上的同位素信号或荧光信号表示与蛋白质结合的DNA片段。 |
| 摘要 | 本发明主要包括制备DNA片段、检测与蛋白质结合的DNA片段和鉴定基因变异的方法。检测蛋白质结合DNA片段的方法：基因组DNA用内切酶酶切或用引物进行的PCR扩增制备出片段，用基团修饰这些DNA片段的末端，使与相应的固相载体表面进行共价交联，用微阵列点样设备将各种DNA片段点样于固相载体表面并共价交联之，制备成DNA芯片，用这种DNA芯片筛选蛋白质结合的DNA片段的方法。 |
| 国际公布 |
