公开(公告)号
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CN1513554A
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公开(公告)日
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2004.07.21
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申请(专利)号
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CN03111295.1
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申请日期
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2003.03.28
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专利名称
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动物狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗
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主分类号
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A61K39/205
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分类号
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A61K39/205;A61K39/00;A61P31/12;C12N15/47
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军军需大学军事兽医研究所
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发明(设计)人
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扈荣良;张守峰;袁慧君
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地址
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130062吉林省长春市西安大路175号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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吉林长春新纪元专利代理有限责任公司
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代理人
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王薇
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国省代码
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吉林;22
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主权项
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一种动物狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗,是以狂犬病病毒SRV9克隆株糖蛋白和核蛋白cDNA经以下步骤分别构建出以pVAX1和pIRES为载体的基因疫苗;(1)、从克隆载体pTG中通过Pst I和Xba I酶切将糖蛋白cDNA克隆入经相同酶切的pVAXl中,构建重组疫苗pVG;(2)、从克隆载体pTN2中用HindIII和Sma I酶切将核蛋白cDNA克隆入经HindIII和EcoRV酶切的pVAXl中,构建重组疫苗pVN;(3)、从克隆载体pVG用EcoR I和Xba I酶切将糖蛋白cDNA克隆入经EcoRV酶切的pIRES中构建重组表达载体pIG;(4)、从克隆载体pTN2中用Hinc II和Xba I酶切将核蛋白cDNA克隆入经Sma I和Xba I酶切的pIG中构建重组疫苗pIGN;(5)、将上述DNA疫苗经碱裂解法制备后,800~4000μg/ml溶于生理盐水中,按糖蛋白:核蛋白按25-100μg:25-100μg/100μl比例混合。
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摘要
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本发明涉及一种动物狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗,是通过RT-PCR和克隆技术获得了狂犬病病毒SRV9克隆株糖蛋白cDNA和核蛋白cDNA,以上述糖蛋白和核蛋白cDNA为目的基因,分别制备了以pVAX1和pIRES为载体的基因疫苗。将两种基因疫苗联合(“二价”),以裸质粒形式或以司苯-甘油为佐剂形式免疫小鼠和犬3-4次后,免疫动物可产生良好的体液免疫和细胞免疫。该“二价”DNA疫苗无感染性,使用安全,免疫效果明确。是预防狂犬病的一种新型疫苗。
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国际公布
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