公开(公告)号
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CN1157484C
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公开(公告)日
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2004.07.14
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申请(专利)号
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CN00806590.X
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申请日期
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2000.04.19
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专利名称
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用于检测磷酸基-N-乙酰胞壁酰五肽移位酶活性的测定方法
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主分类号
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C12Q1/48
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分类号
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C12Q1/48
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分案原申请号
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优先权
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1999.4.22 WO PCT/IN99/00013
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申请(专利权)人
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阿斯特拉曾尼卡有限公司
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发明(设计)人
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K·达斯;J·拉马查德兰
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地址
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瑞典南泰利耶
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颁证日
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2004.07.14
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国际申请
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PCT/SE2000/000772 2000.4.19
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进入国家日期
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2001.10.22
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专利代理机构
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中国专利代理(香港)有限公司
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代理人
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罗宏;姜建成
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国省代码
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瑞典;SE
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主权项
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一种检测磷酸基-N-乙酰胞壁酰五肽移位酶的酶活性的测定方法,其包含下列步骤:(1)在适于酶活性发生的条件下培养反应混合物,其包含,在含水介质中,N-琥珀酰亚胺基[2,3-3H]丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽,N-琥珀酰亚胺基丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽(非-放射性的),二价金属离子源,十一异戊二烯基磷酸酯源,去污剂和移位酶源;(2)在PH~4.2,用含季铵盐的适当缓冲液酸化反应混合物,以终止步骤(1)的酶反应;和(3)提取所形成的任一十一异戊烯醇-焦磷酸酯-[2,3-3H]丙酸酯-N-乙酰胞壁酰五肽产物,并使用闪烁计数器测量放射性。
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摘要
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本发明提供一种检测磷酸基-N-乙酰胞壁酰五肽移位酶的酶活性的测定方法,其包含下列步骤:(1)培养反应混合物,其包含,在含水介质中,N-琥珀酰亚胺基[2,3-3H]丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽,N-琥珀酰亚胺基丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽(非-放射性的),二价金属离子源,十一异戊二烯基磷酸酯源,去污剂和移位酶源,在适于酶活性发生的条件下;(2)在pH~42,用含季铵盐的适当缓冲液酸化反应混合物,以终止步骤(1)的酶反应;(3)提取所形成的任一十一异戊烯醇-焦磷酸酯-[2,3-3H]丙酸酯-N-乙酰胞壁酰五肽产物,并使用闪烁计数器测量放射性,且提供在其中使用的试剂盒。
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国际公布
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WO2000/065087 英 2000.11.2
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