公开(公告)号 | CN1157481C |
公开(公告)日 | 2004.07.14 |
申请(专利)号 | CN01104435.7 |
申请日期 | 2001.02.27 |
专利名称 | 一种不需要反转录步骤的RNA分子PCR扩增法 |
主分类号 | C12P19/34 |
分类号 | C12P19/34 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 黄道培 |
发明(设计)人 | 黄道培;范辛浩 |
地址 | 201206 上海市浦东新金桥路1998号 |
颁证日 | 2004.07.14 |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京万科园知识产权代理有限责任公司 |
代理人 | 张亚军;曹诗健 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种RNA分子的PCR扩增法,该方法不需要反转录步骤,它包括下列步骤:1)核酸杂交:将待测样品中加入裂解杂交液,混匀后再加入PS-DNA,65℃保温过夜,再加入异丙醇沉淀离心后,弃上清液; |
摘要 | 本发明涉及一种不需要反转录的PCR RNA分子扩增法,可用于分子生物学对疾病的诊断。对病原体,尤其是RNA病毒的确诊可广泛用于用血安全等领域,本方法包括产生一种与RNA分子互补的单键DNA保护分子(PS-DNA),这种约300个硷基对的单键DNA片断,可以和RNA(病毒)分子形成DNA:RNA杂交键。又使用了一种抗体和一种酶将由杂交形成的DNA:RNA杂交链通过特异性抗体结合而分离出来,再把未形成DNA:RNA杂交链的残留PS-DNA降解,然后就可以用常规PCR放大,进行产物检测了。该法与RT-PCR法相比较具有杂交效率高于逆转录效率,特异性强,灵敏度高,成本低,操作方便等特点。将适用于多种临床用核酸检测试剂的配制和生产。 |
国际公布 |