| 公开(公告)号 | CN1511592A |
| 公开(公告)日 | 2004.07.14 |
| 申请(专利)号 | CN02159528.3 |
| 申请日期 | 2002.12.30 |
| 专利名称 | 一种含有表皮生长因子的皮肤组织工程支架的构建方法 |
| 主分类号 | A61L27/60 |
| 分类号 | A61L27/60;A61F13/02;A61F2/02 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国皮革和制鞋工业研究院;中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所 |
| 发明(设计)人 | 杨颖颙;于淑贤;刘杰;王德文 |
| 地址 | 100016北京市朝阳区将台西路18号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京科兴园专利事务所 |
| 代理人 | 王蕴;屈献庄 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种含有表皮生长因子的皮肤组织工程支架的构建方法，其特征在于它按下述步骤进行：(a)、以胎牛皮或牛跟腱为基料，按常规方法进行脱毛、去筋膜及脂肪和污血、清洗、冷冻、切薄片，用丙酮脱水，再用石油醚脱脂，制成脱水脱脂的胎牛皮或牛跟腱为原料，用双蒸水清洗原料后加入反应器内，加入原料重量1～5％的胃酶或无花果酶或木瓜酶或胰凝乳蛋白酶或菠萝酶，与原料重量10倍的水配制的水溶液进行一次酶处理，在20～40℃、pH＝2～8条件下、机械振动8～12小时，降解组织纤维间的共价键，经离心分离，弃上清液取沉淀用双蒸馏水洗涤三次以上，加入原料重量的50～150倍的0.5M醋酸溶液，在0～20℃温度下，振动24～32小时，再加入氯化钠，使溶液中氯化钠浓度达到2M，沉淀完全后，经离心分离，弃上清液取沉淀装入透析袋进行透析3～4次，收集透析后胶原溶液，加入反应器内，并加入上述原料重量1～3％的无花果酶或木瓜酶或胰凝乳蛋白酶或菠萝酶，与原料重量10倍的配制的水溶液进行二次酶处理，在30～40℃、pH＝2～8条件下、机械振动4～8小时，去除抗原决定簇；再按常规方法酶灭活处理，经离心分离，弃上清液用原料重量50～150倍的0.05～0.5M的醋酸水溶液溶解，得到酸溶性0.5～4mg/ml的无抗原性胶原溶液；(b)、再将(a)项的无抗原性胶原溶液倒入预冷模型中，在-10～-70℃温度下冷冻4～24小时，再真空冷冻干燥24～48小时，得到孔径均匀，厚度为0.1～0.5mm的胶原海绵膜，然后置入0.5～10％浓度的丙三醇水溶液中，丙三醇水溶液用量为胶原海绵膜重量50～150倍，吸附膨胀后取出胶原海绵膜，在105～130℃温度下，真空干燥18～32小时，得到干胶原海绵膜；(c)、将肝素溶于0.005～1M的醋酸水溶液中，水溶液肝素含量为0.1～10mg/ml，然后用100目滤网过滤，得到肝素醋酸水溶液；(d)、将表皮生长因子溶于三蒸水中，三蒸水中表皮生长因子的含量为0.001～0.1μg/ml，得到表皮生长因子水溶液；(e)、最后将(c)项的肝素醋酸水溶液和(d)项的表皮生长因子水溶液按体积比1∶1～50的比例混合，机械振动48小时后，将上述混合液再与5％的丙三醇水溶液按体积比0.1～5∶100混合后，浸润(b)项的干胶原海绵膜，润湿后，在-10～-70℃温度下，冷冻4～10小时，再真空干燥，得到的构建含有表皮生长因子的皮肤组织工程支架。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种含有表皮生长因子的皮肤组织工程支架的构建方法，其特征是它以胎牛皮或牛跟腱为基料，经过脱水、脱脂处理，进行一次酶处理，降低组织纤维间的共价键，再经透析，进行二次处理，除去抗原决定簇，再用醋酸溶解得到无抗原性胶原溶液，再制成胶原海绵膜，用丙三醇浸泡吸附，经干燥后将肝素醋酸水溶液与表皮生长因子水溶液的混合物与丙三醇再次混合润湿胶原海绵膜，经冷冻干燥构建成皮肤组织工程支架。该支架具有无抗原性、强度高、柔韧性好、手术植入方便、对创伤面无毒害、并可有效诱导创伤面部位自体细胞生长、促进创面愈合的优点及效果。 |
| 国际公布 |
