公开(公告)号
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CN1155714C
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公开(公告)日
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2004.06.30
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申请(专利)号
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CN97198755.6
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申请日期
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1997.09.04
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专利名称
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抗真菌蛋白及其编码DNA和掺入此DNA的宿主
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主分类号
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C12N15/82
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分类号
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C12N15/82;C12N9/02;C12Q1/68;C07K16/40;C12N15/62;A01H5/00
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分案原申请号
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优先权
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1996.9.4 EP 96202466.7; 1997.3.19 EP 97200831.2
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申请(专利权)人
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辛根塔默根有限公司
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发明(设计)人
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M·H·斯图威
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地址
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荷兰莱顿
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颁证日
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2004.06.30
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国际申请
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PCT/EP1997/004923 1997.9.4
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进入国家日期
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1999.04.13
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专利代理机构
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中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
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代理人
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周中琦
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国省代码
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荷兰;NL
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主权项
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获得对选自疫霉属和/或腐霉属的真菌的易感性降低的植物的方法,所述方法包含以下步骤:(a)将嵌合DNA序列导入易于再生出完整植株的祖细胞,所述嵌合DNA序列包含能编码选自SEQ ID NO:15,19,57,70,72和74描述的蛋白质或其突变蛋白的开放阅读框架,该突变蛋白通过替换、添加或缺失一个氨基酸而与所述蛋白质不同,其中该突变蛋白具有抗疫霉属和/或抗腐霉属活性,所述的开放阅读框架可操作性地与转录和翻译起始区以及转录终止区连接,以使在对所述的真菌侵染易感的所述祖细胞中产生所述蛋白或突变蛋白,以及(b)所述嵌合DNA序列编码植物选择性标记,以选择所述选择性标记存在其中的转化祖细胞,以及,(c)在有利于具有所述的选择性标记的祖细胞的条件下使所述祖细胞再生为植株,以及,(d)鉴定产生所述蛋白质或所述突变蛋白的植物,由此降低所述植物对所述疫霉属和/或腐霉属侵染的易感性。
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摘要
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本发明提供可从植物来源获得的具有抗真菌活性,特别是抗疫霉和/或抗腐霉活性并且通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量为约55-65千道尔顿的分离的蛋白;以及包含能编码根据本发明所述的蛋白的开放阅读框架的分离DNA序列,优选地特征在于所含的开放阅读框架能编码在SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:57,SEQ ID NO:70,SEQ IDNO:72或SEQ ID NO:74中所示的蛋白或其突变蛋白。本发明进一步包括掺入了能编码根据本发明所述的蛋白的嵌合DNA并且蛋白在其中表达的植物。本发明也证明了所述蛋白的碳水化合物氧化酶和优选地己糖氧化酶活性。本发明也提供使用该蛋白或能合成该蛋白的宿主细胞来抵抗真菌,尤其是疫霉和腐霉属种类的方法。
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国际公布
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WO1998/013478 英 1998.4.2
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