| 公开(公告)号 | CN1502694A |
| 公开(公告)日 | 2004.06.09 |
| 申请(专利)号 | CN02145433.7 |
| 申请日期 | 2002.11.20 |
| 专利名称 | 通过Cre-LoxP定点打靶体细胞克隆家畜作为乳腺生物反应器的研制 |
| 主分类号 | C12N15/09 |
| 分类号 | C12N15/09;C12N15/12;C12N15/87;C12N5/10;A01K67/00;A01K67/027 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 上海杰隆生物工程股份有限公司 |
| 发明(设计)人 | 成国祥;陈建泉;吴国祥;汤家铭;赵建阳 |
| 地址 | 201203上海市浦东新区张江蔡伦路88号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海专利商标事务所 |
| 代理人 | 徐迅 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种定点打靶体细胞克隆家畜乳腺生物应器的制备方法，其特征在于，包括步骤：(a)通过基因打靶将一构建物定点引入家畜胎儿成纤维细胞，所述的构建物从5′→3′依次含有5′同源臂序列、LoxP序列、第一标记基因、和3′同源臂序列；(b)筛选得到LoxP序列定点整合的家畜胎儿成纤维细胞；(c)将打靶载体与Cre表达质粒/Cre蛋白，共转染LoxP序列定点整合的家畜胎儿成纤维细胞，所述的打靶载体从5′→3′依次含有LoxP序列、外源基因、第二标记基因、LoxP序列，并筛选得到定点整合有外源基因的成纤维细胞；(d)将步骤(c)的成纤维细胞的细胞核，移植入家畜去核卵母细胞，再生成克隆动物。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种通过Cre-LoxP定点打靶体细胞克隆家畜来制备作为乳腺生物反应器的方法。它包括：(a)将含LoxP序列的构建物定点引入成纤维细胞；(b)筛选LoxP序列定点整合的细胞；(c)将含外源基因的打靶载体与Cre表达质粒/Cre蛋白，共转染LoxP序列定点整合的细胞，从而筛选得到定点整合外源基因的细胞；(d)再生成克隆动物。本发明还提供了相应的构建物和克隆细胞。本发明方法可高效地制备定点整合外源基因的乳腺生物反应器。 |
| 国际公布 |
