公开(公告)号 | CN1120239C |
公开(公告)日 | 2003.09.03 |
申请(专利)号 | CN99116930.1 |
申请日期 | 1999.09.30 |
专利名称 | 释放细胞内的L-天门冬酰胺酶的溶液及方法 |
主分类号 | C12N9/82 |
分类号 | C12N9/82;//(C12N9/82:C12R1:19) |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 上海交通大学 |
发明(设计)人 | 赵凤生 |
地址 | 200030上海市华山路1954号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海交达专利事务所 |
代理人 | 王锡麟;马伟敏 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种释放细胞内的L-天门冬酰胺酶的方法,其特征在于将大肠杆菌培养液离心沉淀或过滤,除去液体,得到细胞,用水和磷酸盐、Triton类表面活性剂配制成溶液,将大肠杆菌细胞加入到溶液中,置于搅拌釜中搅拌,或置于摇瓶中振摇一段时间,酶即从细胞内释放到液体中,再经离心沉淀或过滤,除去细胞,溶液中的酶用于进一步纯化,操作温度为4-37℃,酶释放时间4-20小时。 |
摘要 | 一种释放细胞内的L-天门冬酰胺酶的溶液及方法属于生物化学类领域。将大肠杆菌培养液离心沉淀或过滤,除去液体,得到细胞,用水和磷酸盐、Triton类表面活性剂配制成溶液,将大肠杆菌细胞加入到溶液中,搅拌或振摇一段时间,酶即从细胞内释放到液体中,再经离心沉淀或过滤,除去细胞,溶液中的酶用于进一步纯化,操作温度为4-37℃,酶释放时间4-20小时。溶液配制为磷酸盐10%-15%,Triton类表面活性剂1%-45%,其余为水,所述的磷酸盐为含有钾盐或钠的正盐或酸式盐。本发明降低原料成本45%。酶释放率在60%以上。优化条件下的释放率可达70%-80%。对纯度要求不高,用过的磷酸盐可以回收再次使用。 |
国际公布 |