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咖啡因生物合成体系基因组的联合利用

公开(公告)号 CN1495261A  
公开(公告)日 2004.05.12  
申请(专利)号 CN03150243.1  
申请日期 2003.07.22  
专利名称 咖啡因生物合成体系基因组的联合利用  
主分类号 C12P17/18  
分类号 C12P17/18;C12N15/52;A01H1/00  
分案原申请号  
优先权 2002.7.23 JP 213655/2002  
申请(专利权)人 奈良先端科学技术大学院大学  
发明(设计)人 上藤洋敬;佐野浩;小泉望;新名惇彦  
地址 日本奈良县  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 北京市金杜律师事务所  
代理人 杨宏军  
国省代码 日本;JP  
主权项 一种生产7-甲基黄嘌呤、可可碱或咖啡因的方法,是在下述酶(a)、(c)、(d)和细胞提取物(b)的2种或2种以上组合的催化作用下,在生物体外,进行在嘌呤环7位的黄嘌呤核苷的甲基化、在嘌呤环9位的7-甲基黄嘌呤核苷的脱核糖化、在嘌呤环3位的7-甲基黄嘌呤的甲基化、和/或在嘌呤环1位的可可碱的甲基化,生产7-甲基黄嘌呤、可可碱或咖啡因的方法,(a)是具有催化在嘌呤环7位的黄嘌呤核苷的甲基化的活性,具有序列表的序列号:1中所示基酸序列的酶,(b)是具有催化在嘌呤环9位的7-甲基黄嘌呤核苷的脱核糖化的活性,由大肠杆菌得到的细胞粗提取物,(c)是具有催化在嘌呤环3位的7-甲基黄嘌呤的甲基化的活性,具有序列表的序列号:4中所示氨基酸序列的酶,(d)是具有催化在嘌呤环1位的可可碱的甲基化的活性,具有序列表的序列号:7中所示氨基酸序列的酶。  
摘要 提供一种在咖啡因生物合成反应体系中,联合利用分别催化这些反应的酶和分别编码这些酶的基因的方法。该方法为:将酶a.c.d.和细胞提取物b.的2个或2个以上组合,在生物体外,通过进行黄嘌呤核苷的甲基化、7-甲基黄嘌呤核苷的脱核糖化、7-甲基黄嘌呤的甲基化和/或可可碱的甲基化反应,生产7-甲基黄嘌呤、可可碱或咖啡因的方法。a.是催化在嘌呤环7位的黄嘌呤核苷的甲基化,具有序列1所示氨基酸序列的酶;b.是催化在嘌呤环9位的7-甲基黄嘌呤核苷的脱核糖化,由大肠杆菌得到的细胞粗提取物;c.是催化在嘌呤环3位的7-甲基黄嘌呤的甲基化,具有序列4所示氨基酸序列的酶;d.是催化在嘌呤环1位的可可碱的甲基化,具有序列7所示氨基酸序列的酶。  
国际公布  
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