公开(公告)号
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CN1148452C
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公开(公告)日
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2004.05.05
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申请(专利)号
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CN99116862.3
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申请日期
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1999.09.10
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专利名称
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分泌性融合蛋白的酵母表达
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主分类号
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C12N15/62
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分类号
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C12N15/62;C12N15/27;C12N15/24;C12N15/64;C12N15/81;//(C12N15/62,C12R1:84)
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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上海兆安医学科技有限公司
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发明(设计)人
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楼觉人
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地址
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200021 上海市淮海中路283号香港广场南座2005室
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颁证日
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2004.05.05
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海专利商标事务所
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代理人
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徐迅
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种表达分泌性的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素3的融合蛋白MX的方法,其特征在于,该方法包括:(a)将粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的编码序列和白细胞介素3的编码序列融合在一起,形成编码融合蛋白MX的多核苷酸序列,所述的多核苷酸序列编码氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的融合蛋白;(b)将步骤(a)中编码融合蛋白MX的多核苷酸序列插入到表达载体,形成含有融合蛋白MX编码序列的表达载体;(c)将步骤(b)中含有融合蛋白MX编码序列的表达载体转入巴斯德毕赤酵母细胞;(d)筛选出MX编码序列整合入基因组的转化的巴斯德毕赤酵母细胞;(e)在适合编码MX融合蛋白的条件下,培养步骤(d)中转化的巴斯德毕赤酵母细胞;(f)分离出MX融合蛋白。
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摘要
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本发明涉及在酵母中表达分泌性的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素3(IL-3)的融合蛋白(简称为“MX融合蛋白”)的方法,还涉及生产该融合蛋白的工程菌和所生产的融合蛋白MX。本发明的MX融合蛋白基因十分稳定,可调控表达,且产物为天然氨基酸蛋白序列,无置换突变。
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国际公布
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