公开(公告)号 | CN1491964A |
公开(公告)日 | 2004.04.28 |
申请(专利)号 | CN02145913.4 |
申请日期 | 2002.10.23 |
专利名称 | 一种纯化血红蛋白的方法 |
主分类号 | C07K14/805 |
分类号 | C07K14/805;C07K1/14 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国科学院过程工程研究所 |
发明(设计)人 | 苏志国;路秀玲;金业涛;赵东旭 |
地址 | 100080北京市海淀区中关村北二条1号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 |
代理人 | 王凤华 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种纯化血红蛋白的方法,包括如下步骤:(1)床层平衡:用pH值为5.0~8.0的平衡液缓冲液以2~5cm/min-1的线流速自下而上平衡扩张床吸附介质,直至扩张床层稳定后;其中扩张床吸附介质为粒径分布在50~300μm之间的阳离子交换介质或金属亲和层析介质;(2)进料吸附:将红细胞裂解液pH值调成5.0~8.0,以2~5cm/min-1的线流速自下而上进料,进料过程中注意保持适当高度和空隙率;(3)淋洗:进料完毕后,保持床层扩张状态,用pH值为5.0~8.0的平衡液缓冲液以2~5cm/min-1的线流速自下而上洗去滞留在床层中未结合的蛋白、细胞碎片等杂质和其它与介质结合不牢的物质;(4)改变pH值洗脱:将床层改为固定床操作,在2~20℃温度情况下,用pH值为6.0-8.0的平衡缓冲液以2~5cm/min-1的线流速自上而下流过床层,收集样品,整个纯化过程控制在2-20℃。 |
摘要 | 本发明提供了一种纯化血红蛋白的方法。本方法采用扩张床吸附技术,以自下而上的进料方式使层析介质膨胀扩张,细胞碎片、杂蛋白等杂质直接通过床层,血红蛋白被介质吸附,实现从人或牛、猪、羊等动物的血红细胞裂解液中直接纯化血红蛋白。该技术省去离心或过滤去除碎片步骤,仅一步操作产品即达电泳纯,操作时间短,提取收率高,产品活性损失小,是一种简捷、高效、适合工业化生产的天然血红蛋白制备方法。 |
国际公布 |