共表达HIV-1CNB结构蛋白与hIL-6的重组鸡痘病毒活载体疫苗
公开(公告)号
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CN1490052A
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公开(公告)日
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2004.04.21
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申请(专利)号
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CN02133236.3
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申请日期
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2002.10.18
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专利名称
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共表达HIV-1CNB结构蛋白与hIL-6的重组鸡痘病毒活载体疫苗
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主分类号
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A61K39/275
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分类号
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A61K39/275;A61P31/12
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军军需大学军事兽医研究所
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发明(设计)人
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金宁一;江文正;李子健;张立树;金洪涛
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地址
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吉林省长春市西安大路175号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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吉林长春新纪元专利代理有限责任公司
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代理人
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白冬冬
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国省代码
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吉林;22
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主权项
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一种共表达HIV-1CNB结构蛋白与hIL-6的重组鸡痘病毒活载体疫苗,其特征在于:该疫苗提供三株共表达中国流行株I型人免疫缺陷病毒B亚型(HIV-1CNB)结构蛋白与细胞因子人白细胞介素6(hIL-6)的重组鸡痘病毒vPUTAIL6-GAG、vPUTAIL6-GP和vPUTAIL6-GE,它们分别共表达HIV-1CNB核心蛋白gag、外膜蛋白gp120或gag-gp120嵌合蛋白与hIL-6,该三株重组病毒均可刺激机体产生抗HIV-1的特异性体液免疫和细胞免疫。2、根据权利要求1所述的共表达HIV-1CMB结构蛋白与hIL-6的重组鸡痘病毒活载体疫苗的构建方法,其特征在于:将HIV-1CNB核心蛋白gag基因和外膜蛋白gp120基因以及二者嵌合后,分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTAL复合启动子ATI-P7.5×20下游,同时将细胞因子hIL-6插入到串联启动子P7.5×16下游,构建含HIV-1CNB gag、gp120或gag-gp120嵌合基因和hIL-6基因的重组鸡痘病毒表达质粒;将构建的重组质粒与鸡痘病毒株在鸡胚成纤维细胞内进行同源重组,并用5-溴脱氧核糖尿苷(BUdR)进行加压筛选;重组病毒分别经PCR、Western blot和免疫荧光试验进行检测,筛选阳性重组鸡痘病毒;将筛选的阳性重组鸡痘病毒分别免疫BALBc小鼠并进行免疫学指标的检测。
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摘要
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一种共表达HIV-1CNB结构蛋白与hIL-6的重组鸡痘病毒活载体疫苗,属于生物技术领域。该疫苗提供三株共表达中国流行株I型人免疫缺陷病毒B亚型(HIV-1CNB)结构蛋白与细胞因子人白细胞介素6(hIL-6)的重组鸡痘病毒vPUTAIL6-GAG、vPUTAIL6-GP和vPUTAIL6-GE,它们分别共表达HIV-1CNB核心蛋白gag、外膜蛋白gp120或gag-gp120嵌合蛋白与hIL-6,该三株重组病毒均可刺激机体产生抗HIV-1的特异性体液免疫和细胞免疫。本发明得到的三株重组鸡痘病毒对实验动物是安全的,无任何病理现象出现。具有很好的遗传稳定性,经多次传代后外源基因不丢失,且可在非禽属动物(如哺乳动物)细胞中表达外源蛋白。所使用的目的基因为中国流行株HIV-1 B亚型的结构蛋白基因,从而构建的重组鸡痘病毒可作为我国预防和治疗AIDS的活载体疫苗。本发明中重组鸡痘病毒表达的细胞因子hIL-6起到了免疫佐剂的作用。
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国际公布
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