网站首页
开云app安装不了怎么办
药师
护士
卫生资格
高级职称
住院医师
畜牧兽医
医学考研
医学论文
医学会议
开云app安装
网校
论坛
招聘
最新更新
网站地图
您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:重组chBJSTWO蛋白的制备方法及其用途专利检索:专利号/专利人/发明人
    

重组chBJSTWO蛋白的制备方法及其用途

公开(公告)号 CN1490409A  
公开(公告)日 2004.04.21  
申请(专利)号 CN03150527.9  
申请日期 2003.08.20  
专利名称 重组chBJSTWO蛋白的制备方法及其用途  
主分类号 C12N15/09  
分类号 C12N15/09;C12N15/12;C12N15/63;C12P21/00;A61K39/39;A61P37/04;A61P31/12;A61P31/04;A61P33/00  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 浙江大学  
发明(设计)人 周继勇;陈吉刚;王金勇;吴建祥  
地址 310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 杭州求是专利事务所有限公司  
代理人 张法高  
国省代码 浙江;33  
主权项 一种重组chBJSTWO蛋白的制备方法,其特征在于它的步骤如下:1)自中国的仙居鸡、丝羽乌骨鸡和外来品种艾维茵肉鸡的脾淋巴细胞中克隆出chBJSTWO的cDNA与含有PBAD启动子的原核表达载体pBAD/His B组建成表达载体pBAD/His B/chBJSTWO;或者上述chBJSTWO cDNA与含有PAUG1启动子的真核表达载体pMETαA组建成分泌型表达载体pMETαA/chBJSTWO;或者上述chBJSTWOcDNA与含有PAUG1启动子的真核表达载体pMETA组建成胞内表达型表达载体pMET A/chBJSTWO;2)用RM作为基础培养基,通过发酵扩增大肠杆菌工程菌LMG194;3)用BMDY作为基础培养基,通过发酵扩增酵母工程菌PMAD11和PMAD16,在表达不同时间加氮源、碳源等营养素;4)大肠杆菌LMG194和酵母菌PMAD16诱导后经超声波裂解、离心去沉淀即可得到chBJSTWO粗制品,PMAD11表达的chBJSTWO主要以分泌形式存在于培养基中,经过离心取上清即可得到chBJSTWO粗制品;用Ni-NTA Argarose蛋白纯化系统可得到chBJSTWO纯品;5)粗制品或纯品加入甘酸等稳定剂和助溶剂后,无菌过滤、分装和冻干后制成成品,保存于-20℃的冷藏环境中。  
摘要 本发明公开了一种重组chBJSTWO蛋白的制备方法及其用途。RT-PCR扩增的不同品系鸡BJSTWO的cDNA片段与原核表达载体pBAD/His B、真核表达载体pMETαA和真核表达载体pMETA构建表达质粒pBAD/His B/chBJSTWO、pMETαA/chBJSTWO和pMETA/chBJSTWO,分别转化大肠杆菌LMG194、酵母菌株PMAD11和PMAD16后诱导表达。大肠杆菌和酵母菌PMAD16诱导后经超声波裂解、离心去沉淀即可得到chBJSTWO粗制品,PMAD11表达的chBJSTWO主要以分泌形式存在于培养基中,经过离心取上清即可得到chBJSTWO粗制品。用Ni-NTA Argarose蛋白纯化系统可以较快的得到chBJSTWO纯品,粗制品或纯品可以作为免疫佐剂、抗病添加剂和疾病治疗药物。本发明具有工艺流程简单,生产成本低,稳定性好,生物学活性高等特点。  
国际公布  
...
评论加载中...
网 名: (必填项)
评论内容:
关于我们 - 联系我们 -版权申明 -诚聘英才 - 网站地图 - 医学论坛 - 医学博客 - 网络课程 - 帮助
医学全在线 版权所有© CopyRight 2006-2046,
浙ICP备12017320号-1
百度大联盟认证绿色会员可信网站 中网验证
Baidu
map