一类双链RNA分子及其在制备抑制乙型肝炎病毒复制药物中的应用
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公开(公告)号
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CN1488761A
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公开(公告)日
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2004.04.14
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申请(专利)号
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CN03142232.2
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申请日期
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2003.08.13
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专利名称
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一类双链RNA分子及其在制备抑制乙型肝炎病毒复制药物中的应用
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主分类号
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C12P19/34
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分类号
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C12P19/34;C12N15/70;A61K31/7088;A61P1/16;A61P31/12
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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复旦大学;上海恒达科技发展股份有限公司
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发明(设计)人
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钱志康;宣宝琴;徐剑锋;李琳
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地址
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200433上海市邯郸路220号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海正旦专利代理有限公司
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代理人
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陆飞
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种利用大肠杆菌发酵制备用RNAi用ldsRNA和siRNA分子的方法，其特征在于包括构建ldsRNA表达载体，并转化大肠杆菌宿主菌，通过大规模发酵，用碱-SDS法抽提发酵菌体得到全RNA和质粒DNA的混合物；该混合物用CF-11柱进行纯化得到ldsRNA，并利用大肠杆菌RNase III将ldsRNA切成12-30bp的siRNA。
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摘要
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本发明属于分子生物学与生物医药技术领域，具体为一种利用大肠杆菌发酵制备RNA干扰用双链RNA分子或小干扰RNA分子的方法，并将这些RNA分子用于制备治疗乙型肝炎的药物。将本发明得到的ldsRNA或siRNA以适当的比例与乙型肝炎病毒表达载体混合，并用尾静脉液压法注射到小鼠体内。结果显示非同源性序列ldsRNA和siRNA基本不抑制乙型肝炎病毒在小鼠体内的复制，而与乙肝病毒基因同源性的ldsRNA和siRNA可以有效抑制乙型肝炎病毒在小鼠体内的感染复制，抑制率高达90％以上。
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国际公布
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