公开(公告)号
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CN1487086A
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公开(公告)日
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2004.04.07
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申请(专利)号
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CN03137202.3
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申请日期
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2003.05.26
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专利名称
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表达人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的酵母重组株及rhGM-CSF的纯化方法
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主分类号
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C12N15/63
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分类号
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C12N15/63;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/12;C12N15/27;C12P21/02;C07K14/535;C07K1/36;//(C12N1/19,C12R1∶84)
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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海南国栋药物研究所
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发明(设计)人
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梁国栋;周鹏;夏中宁;蒲广西
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地址
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571101海南省海口城西仁里坡华南热带农业大学海口校区教学综合楼7层
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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海南;66
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主权项
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一种表达重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的分泌型表达载体,其特征在于,该载体含有:重组的rhGM-CSF序列,其被插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游位点,删除Kex2(Lys-Arg)位点之后的Ste13位点(Glu-Ala-Glu-Ala)和启始密码子ATG,构建成rhGM-CSF分泌型表达载体。
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摘要
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本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的分泌型表达载体和一种简易纯化方法,用该分泌型表达载体转化的宿主细胞,以及用上述表达载体的毕赤氏酵母重组工程菌株发酵表达rhGM-CSF的方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统,目标蛋白rhGM-CSF不需要复性,其生物比活性可达到3.4×107单位/毫克蛋白,低毒副作用;因此,本发明的方法制得的rhGM-CSF不仅产率高,而且纯化工艺简便、成本低、产品毒副作用低。
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国际公布
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