公开(公告)号 | CN1143893C |
公开(公告)日 | 2004.03.31 |
申请(专利)号 | CN01144317.0 |
申请日期 | 2001.12.14 |
专利名称 | 一种精氨酸酯酶的制备方法 |
主分类号 | C12N9/18 |
分类号 | C12N9/18;A61P1/16 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 周肖林;陈远聪 |
发明(设计)人 | 周肖林;陈远聪 |
地址 | 333000 江西省景德镇经公桥蛇类研究所 |
颁证日 | 2004.03.31 |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 中科专利商标代理有限责任公司 |
代理人 | 朱黎光;张占榜 |
国省代码 | 江西;36 |
主权项 | 一种精氨酸酯酶的制备方法,其特征是该方法包括如下步骤:步骤a:取江浙蝮蛇毒冻干粉溶于0.05Mtris-HCl,pH7.8缓冲液中,4℃下离心除去不溶物,取上清液;步骤b:上清液先经DEAE纤维素DE-52柱层析,层析柱先用Tris-HCl缓冲液平衡后,用含NaCl的缓冲液从0至0.5M进行梯度洗脱,收集含精氨酸酯酶活性的组分,浓缩,去盐后,进行下一步分离;步骤c:用CM-Sepharose柱层析分离,平衡液是0.05M醋酸钠pH5.0缓冲液,洗脱液含0至0.5MNaClpH5.0的醋酸钠缓冲液梯度洗脱,收集含精氨酸酯酶活性组分,浓缩,去盐后再做下一步分离;步骤d:用Sephadex-75柱层析疑胶过滤分离,洗脱液为0.05MNaHCO3含0.1MNaCl溶液,收集精氨酸酯酶组分,浓缩,去盐,冻干后得产品。 |
摘要 | 本发明涉及从江浙蝮蛇毒中提取肝活素的方法,这种肝活素的主要成分为精氨酸酯酶,其药理功能是降低血粘度,改善微循环,对肝炎病毒感染细胞的发展有抑制作用,能促进肝功能的恢复。由于江浙蝮蛇毒中含有神经毒素和出血毒素等有害成分,本发明的方法是利用经过三柱层板分离纯化,能将这些毒性物质除掉,精氨酸酯酶的含量达90%以上。动物试验表明毒性很小,试验剂量为临床用量的数十倍,因而可保证临床用药安全。 |
国际公布 |