公开(公告)号
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CN1142281C
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公开(公告)日
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2004.03.17
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申请(专利)号
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CN98100248.X
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申请日期
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1998.01.19
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专利名称
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重组人红细胞生成素制剂的制备生产方法
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主分类号
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C12N15/79
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分类号
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C12N15/79;C12N15/67;C12N1/00;C12P21/02;C07K14/505
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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沈阳三生制药股份有限公司
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发明(设计)人
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娄丹;徐莉萍;邹钟诚
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地址
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110141 辽宁省沈阳市经济技术开发区十号路1甲3高军
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颁证日
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2004.03.17
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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辽宁;21
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主权项
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一种表达人红细胞生成素的方法,包括对于含有编码人红细胞生成素的核苷酸序列的CHO细胞进行培养,其特征在于,先用含有胎牛血清的DMEM培养基将含有编码人红细胞生成素的核苷酸序列的CHO细胞接种液在细胞罐内扩增培养,再将培养基更换为无血清的合成培养基,连续灌流培养,所述无血清的合成培养基中含有胰岛素、转铁蛋白、糖及碳酸氢钠。
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摘要
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本发明公开了一种大规模生产人红细胞生成素的制剂方法。该方法包括用添加了胰岛素和转铁蛋白的营养培养基,于特定培养条件下培养携带人促红细胞生成素DNA编码序列的被转化的哺乳动物细胞,以获得该蛋白质产物的高表达。然后对富含人红细胞生成素的收获液依次进行亲和层析、离子交换、反相高效液相及凝胶过滤纯化,以获得纯度高并具有高生物活性的人红细胞生成素。
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国际公布
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