通过检测人类T细胞受体TCR基因在治疗前后的变化来评价治疗HIV药物疗效的方法
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公开(公告)号
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CN1480537A
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公开(公告)日
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2004.03.10
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申请(专利)号
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CN02131070.X
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申请日期
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2002.09.28
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专利名称
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通过检测人类T细胞受体TCR基因在治疗前后的变化来评价治疗HIV药物疗效的方法
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主分类号
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C12Q1/68
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分类号
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C12Q1/68
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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北京佰仁思生物工程有限责任公司
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发明(设计)人
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寇忠琛
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地址
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102200北京市海淀区中关村科技园区昌平园星火街6号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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北京汇泽知识产权代理有限公司
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代理人
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张若华
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国省代码
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北京;11
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主权项
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通过检测人类T细胞受体TCR基因在治疗前后的变化来评价治疗HIV药物疗效的方法，其步骤为：a.血样经采集分离后，得到外周血单个核细胞(PBMC)，再进一步分离出CD4或CD8T细胞；b.分离和提纯出T细胞的mRNA后，通过mRNA合成得到cDNA；c.在极其靠近CDR3区段V基因区设计24个内侧Vβ基因引物和一个侧Cβ基因引物，C区基因引物的5′端插入七个非模板碱基(GTTTCTT)，Cβ基因引物采用高灵敏度的荧光(6-FAM)标记；d.将设计的引物和由mRNA合成的cDNA通过两次PCR反应来扩增cDNA；e.将经过两次PCR反应扩增并被荧光标记的T细胞受体基因，与甲酰胺混合后94℃变性，将样本置于含6％丙烯酰胺的测序凝胶中，在DNA测序机上运行，得到的数据用ABIPRISMGeneScan分析软件进行分析和量化，得出药物疗效的评价结果。
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摘要
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发明提供一种通过设计的特定引物来完成PCR反应，放大感染HIV病毒的患者的T细胞受体TCR基因在接受药物治疗前后的变化，进而评价药物的疗效的方法，本发明提供的技术不但填补了技术上的空白而且具有灵敏度高，准确性好的优点。
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国际公布
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