一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法
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公开(公告)号
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CN1140633C
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公开(公告)日
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2004.03.03
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申请(专利)号
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CN00114063.9
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申请日期
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2000.02.03
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专利名称
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一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法
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主分类号
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C12Q1/68
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分类号
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C12Q1/68
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军第一军医大学
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发明(设计)人
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徐湘民;肖维威;钟雄霖;刘忠英
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地址
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510515 广东省广州市同和
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颁证日
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2004.03.03
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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广州科粤专利代理有限责任公司
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代理人
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余炳和
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法，包括对人基因DNA待测样品的PCR扩增和对经PCR扩增后的产物进行电泳分析，其特征在于采用4个引物P1、P2、P7、P4组成2对PCR反应，该PCR体系的引物设计方案为：(1)引物P1和P2组成一对扩增-SEA/基因的引物，这2个引物分别位于该缺失基因5’断裂点的上游和3’断裂点的下游；引物P7、P4组成一对扩增正常等位基因的引物，这2个引物的结合点均位于中国人常见的α地贫基因缺失区内，即引物所在区域是--SEA/、-α3.7/和-α4.2/这三种基因的共同缺失点；(2)在每条引物的特异性基因序列的5’端连上一段由20个核苷酸组成的与人类基因不同源的高GC含量的序列，该20个核苷酸长度的寡核苷酸与特异性引物序列直接连接，其合成方式与普通引物相同，这样，构成此2重PCR体系的4个这种加长的寡核苷酸引物的5’端均含有一个共同尾序列。
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摘要
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本发明提供一种缺失型人α珠蛋白基因的PCR检测方法，本发明采用4个(2对)引物P1、P2、P7、P4组成2对PCR反应，分别针对正常等位基因和缺失等位基因(-SEA/基因)，提供了引物的设计方案和结果的解释。根据本发明的新方案所建立的检测-SEA缺失基因的方法，经实验证实可在同一试管内同时实现2对特异性PCR引物的扩增，且有很好的重复性。本方法除提供-SEA缺失基因检测信息外，还能一次检测提供多种有价值的特定α珠蛋白基因缺失的信息。
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国际公布
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