公开(公告)号 | CN1478903A |
公开(公告)日 | 2004.03.03 |
申请(专利)号 | CN02136716.7 |
申请日期 | 2002.08.29 |
专利名称 | 一种制备人载脂蛋白基因重组蛋白的方法 |
主分类号 | C12P21/02 |
分类号 | C12P21/02;C12N15/09;C12N15/63 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 上海凯曼生物科技有限公司 |
发明(设计)人 | 周鸣南;龚邦强 |
地址 | 200233上海市田林路219号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海开祺专利代理有限公司 |
代理人 | 费开逵 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种人载脂蛋白ApoAIMilano的制备方法,其特征在于1-采用RT-PCR技术从人肝细胞中获得人载脂蛋白基因片段;1-2、通过PCR直接位点突变的方法制得人载脂蛋白基因;1-3、将上述获得的人载脂蛋白基因克隆到PMD-T载体上,进行DNA序列测定,然后从PMD-T载体上切下,克隆到表达载体PMZG上,建成表达重组质粒pMZG-3,将此构建的表达人载脂蛋白重组质粒转化进入宿主菌大肠杆菌内,组建成工程菌;1-4、表达工程菌发酵、发酵液处理、纯化,得人载脂蛋白;1-5、纯化的人载脂蛋白用谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽处理,形成人载脂蛋白的二聚体肽。 |
摘要 | 本发明公开了一种人载脂蛋白ApoAIMilano二聚体肽的制备方法,它采用基因重组技术将人的ApoAIMilano基因克隆到表达载体上,构建成表达重组质粒,并转化进入大肠杆菌,组建成表达工程菌,经发酵、纯化工艺获得人ApoAIMilano蛋白,它可用于治疗急性动脉粥样硬化斑块形成而导致的心绞痛、心肌梗死等冠状动脉综合症。 |
国际公布 |