一种快速高效分离和纯化重组腺病毒相关病毒的方法和用途
公开(公告)号
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CN1139656C
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公开(公告)日
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2004.02.25
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申请(专利)号
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CN99123723.4
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申请日期
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1999.11.17
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专利名称
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一种快速高效分离和纯化重组腺病毒相关病毒的方法和用途
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主分类号
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C12N7/02
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分类号
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C12N7/02;C12N15/861;A61K48/00;A61P43/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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本元正阳基因技术股份有限公司
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发明(设计)人
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吴小兵;董小岩;侯云德
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地址
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100176 北京市北京经济技术开发区永昌中路6号
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颁证日
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2004.02.25
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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北京;11
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主权项
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一种rAAV病毒分离、纯化的方法,其特征是,以含有rAAV病毒的细胞及培养液作为粗制裂解液,经过以下步骤进行分离、纯化:1)在粗制裂解液中加入氯仿,灭活HSV辅助病毒、裂解细胞、使大量细胞蛋白变性沉淀,得到细胞裂解液;
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摘要
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本发明利用AAV病毒颗粒具有抗氯仿处理的特点,提出了一种用PEG/NaCl系统和氯仿快速而高效分离和纯化rAAV病毒的方法。该方法适合于大规模分离和纯化rAAV病毒和生产工艺化。尤其适用于以HSV病毒为辅助病毒产生的rAAV的纯化,也可用于无辅助病毒包装系统或无细胞体外包装系统生产的rAAV的纯化。经本发明纯化的rAAV病毒可用于基因转移和基因治疗。
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国际公布
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