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您现在的位置: 医学全在线 > 药学理论 > 中国药品专利文献 > 正文:利用RNA干扰现象介导功能基因下调的腺相关病毒载体专利检索:专利号/专利人/发明人
    

利用RNA干扰现象介导功能基因下调的腺相关病毒载体

医药数据库中心 药学论坛 本元正阳基因技术股份有限公司;病毒基因工程国家重点实验室/吴小兵;马鑫;鲁晓春;侯云德
公开(公告)号 CN1475573A  
公开(公告)日 2004.02.18  
申请(专利)号 CN02125762.0  
申请日期 2002.08.16  
专利名称 利用RNA干扰现象介导功能基因下调的腺相关病毒载体  
主分类号 C12N15/63  
分类号 C12N15/63;C12N15/52;C12N15/86;C12N7/01  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 本元正阳基因技术股份有限公司;病毒基因工程国家重点实验室  
发明(设计)人 吴小兵;马鑫;鲁晓春;侯云德  
地址 100176北京市北京经济技术开发区永昌中路6号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 北京;11  
主权项 应用AAV载体质粒pSNAV构建携带有RNAi核苷酸转录单元重组质粒;  
摘要 本发明涉及用质粒携带RNAi核苷酸片段,将携带RNAi的质粒转染至体外培养的细胞内或动物体内,从而使质粒能在细胞内或动物体内源源不断地复制RNAi核苷酸片段,来达到RNAi核苷酸片段应起到的生物学作用。另外,该RNAi核苷酸片段也被包装成为一种携带了RNAi核苷酸片段的重组腺相关病毒载体,通过腺相关病毒载体进行RNAi核苷酸片段的基因转移和复制,来达到RNAi核苷酸片段应起到的生物学作用。在本发明中,构建了一个短发夹环表达质粒在BHK-21细胞中抑制荧光素酶的表达。具体方法是从人基因组DNA中设计引物用PCR调出人U6 snRNA启动子,与被9bp序列间隔的21bp荧光素酶靶序列的反向重复,以及AAV载体质粒pSNAV相连接,构建成荧光素酶RNAi表达质粒pSNAV/U6/Luc。与pMAMneoLuc质粒共转染BHK-21细胞,以及单独转染荧光素酶细胞株,分别检测对荧光素酶表达的抑制效果。实验结果显示pSNAV/U6/Luc对共转染的pMAMneoLuc中荧光素酶的表达抑制50%,而对荧光素酶细胞株中荧光素酶的表达抑制70%。抑制实验证实体内转录出的短发夹环荧光素酶能够有效抑制其在BHK-21细胞中的表达。  
国际公布  
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