来源于八棱丝瓜的核糖体失活蛋白
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公开(公告)号
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CN1137135C
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公开(公告)日
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2004.02.04
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申请(专利)号
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CN97112602.X
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申请日期
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1997.05.16
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专利名称
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来源于八棱丝瓜的核糖体失活蛋白
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主分类号
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C07K7/06
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分类号
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C07K7/06;C07K1/36;A61K38/08;A61P35/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国科学院福建物质结构研究所
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发明(设计)人
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陈明晃;林玉娟;叶晓明
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地址
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350002 福建省福州市鼓楼区山头角123号
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颁证日
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2004.02.04
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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福建;35
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主权项
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一种来源于八棱丝瓜的核糖体失活蛋白-八棱丝瓜蛋白1，其特征在于，N端氨基酸顺序为：Asp-Val-Ser-Phe-Ser-，分子量为28KD，具有强烈抑制细胞内核糖体蛋白质合成的活性，该蛋白是由包括以下七个步骤分离得到的核糖体失活蛋白：(1)八棱丝瓜籽经粉碎后，加盐溶液抽提、匀浆两次，置4℃过夜；(2)加1N盐酸调pH3.8，静置2小时，过滤或离心得上清液；(3)进一步加固体硫酸铵分级沉淀，离心得40％-95％饱和度的硫酸铵沉淀；(4)上述硫酸铵沉淀对pH6.5，5mM磷酸钠缓冲液透析24h，超速离心得上清液；(5)上清液上样CM-52纤维素柱，用0-0.3M NaCl，pH6.5，5mM磷酸钠缓冲液梯度洗脱，280nM实时检测流出液，收集峰3；(6)合并峰3，对pH7.2，10mM磷酸钠缓冲液透析，透析液加入DEAE纤维素-52搅拌后过滤；(7)滤液再上CM-52纤维素柱，用0-0.5M NaCl，pH7.2，10mM磷酸钠缓冲液梯度洗脱，280nM实时检测流出液，收集一尖峰，该峰即为纯化的八棱丝瓜蛋白1。
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摘要
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从葫芦科植物八棱丝瓜种子中分离出2种核糖体失活蛋白—八棱瓜蛋白1和2，其分子量都是28KD(SDS-PAGE检测)。八棱瓜蛋白1的N端5个氨基酸残基为DVSFS。采用了简化的温和的提取方法，获得了高产率，高纯度，高活性的蛋白。该蛋白具有作为引产药物和抗病毒制剂的商业应用，并可作为N-糖苷酶用于分子生物学和免疫学研究。
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国际公布
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