表达为不溶性聚集体的重组蛋白质的纯化方法
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公开(公告)号
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CN1468255A
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公开(公告)日
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2004.01.14
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申请(专利)号
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CN01815355.0
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申请日期
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2001.08.18
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专利名称
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表达为不溶性聚集体的重组蛋白质的纯化方法
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主分类号
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C07K1/113
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分类号
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C07K1/113;C07K1/36
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分案原申请号
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优先权
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2000.9.8 DE 10044360.5
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申请(专利权)人
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默克专利股份公司
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发明(设计)人
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R·苏克;O·克罗姆维尔;H·费比
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地址
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德国达姆施塔特
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颁证日
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国际申请
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PCT/EP01/09552 2001.8.18
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进入国家日期
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2003.03.07
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专利代理机构
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中国专利代理(香港)有限公司
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代理人
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张元忠;孟凡宏
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国省代码
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德国;DE
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主权项
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纯化的重组蛋白质的制备方法，该蛋白质是可溶解的生物活性物的形式且可作为生理学介质直接用于医疗用途，该制备源于细菌表达后的蛋白质聚集体(“包埋体”)，后者不溶于表达介质，该方法特点在于进行了以下步骤：(i)将分离出的不溶性蛋白质聚集体摄取入有机变性试剂中，(ii)将(i)所得溶液使用基本无机非缓冲的碱性含盐洗脱液通过至少一个色谱步骤进行纯化，和(iii)将得自最终纯化步骤的含有不溶的，复性的且有生物活性的蛋白质的碱性溶液中和。
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摘要
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本发明涉及表达于细菌宿主细胞中且以不溶性聚集体形式沉淀(包埋体)的重组蛋白质的溶解与纯化方法。纯化基于将所述包埋体用有机变性试剂并使用色谱法转化为可溶形式。此处选用无机的，碱性的，含盐的洗脱剂，其在纯化完成后使重组蛋白质在中和后可以成为能够直接用于医药用途且为生理学可接受的形式。该方法特别适用于纯化过敏原和过敏原片断。
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国际公布
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WO02/20559 德 2002.3.14
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