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您现在的位置: 医学全在线 > 药学理论 > 中国药品专利文献 > 正文:白细胞介素-12的高效表达方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

白细胞介素-12的高效表达方法

医药数据库中心 药学论坛 中国科学技术大学/田志刚;刘文涛;魏海明
公开(公告)号 CN1467292A  
公开(公告)日 2004.01.14  
申请(专利)号 CN03131567.4  
申请日期 2003.05.27  
专利名称 白细胞介素-12的高效表达方法  
主分类号 C12N15/24  
分类号 C12N15/24;C12N5/08  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中国科学技术大学  
发明(设计)人 田志刚;刘文涛;魏海明  
地址 230026安徽省合肥市金寨路96号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 南京经纬专利商标代理有限公司  
代理人 沈廉  
国省代码 安徽;34  
主权项 一种白细胞介素-12的高效表达方法,其特征在于分别将IL-12的P40亚单位编码区cDNA插入pcDNA3真核表达载体、将IL-12的P35亚单位编码区cDNA插入pEE14真核高效表达载体,分别构建pcDNA3/p40、pEE14/p35两种表达效率不同的真核细胞重组质粒,共转染宿主细胞后,在筛选培养基中同时加入G418和MSX进行筛选,挑取存活的阳性克隆进行鉴定,获得高表达的IL-12的阳性克隆;用MSX对高表达的阳性克隆进行加压扩增,获得具有产业化价值的高表达IL-12的工程细胞株。  
摘要 白细胞介素-12的高效表达方法涉及一种由生物技术制备白细胞介素-12(IL-12)的方法,该方法分别将IL-12的P40亚单位编码区cDNA插入pcDNA3真核表达载体、将IL-12的P35亚单位编码区cDNA插入pEE14真核高效表达载体,分别构建了pcDNA3/p40、pEE14/p35两种真核细胞重组质粒,共转染宿主细胞后,在筛选培养基中同时加入G418和MSX进行筛选,挑取存活的阳性克隆,对各阳性克隆加压扩增,获得高表达IL-12的工程细胞株。该方法简便的利用IL-12 P40和P35天然表达不平衡的特性,采用两种表达效率不同的载体,以使两条链的表达尽量平衡。  
国际公布  
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