| 公开(公告)号 | CN1133651C |
| 公开(公告)日 | 2004.01.07 |
| 申请(专利)号 | CN99111530.9 |
| 申请日期 | 1999.08.20 |
| 专利名称 | 蛇毒神经生长因子的制法 |
| 主分类号 | C07K14/48 |
| 分类号 | C07K14/48 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 郝文学 |
| 发明(设计)人 | 潘清;郝文学 |
| 地址 | 116600辽宁省大连开发区黄海西路148号大连司威特制药有限公司 |
| 颁证日 | 2004.01.07 |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | |
| 代理人 | |
| 国省代码 | 辽宁;21 |
| 主权项 | 蛇毒神经生长因子的制法，其特征在于：所有操作均在10℃以下完成，①CM-SephadexC50层析取眼镜蛇毒10g，溶于0.01M乙酸钠缓冲液、PH5.8 100ml中，溶解后，离心10000转，10分钟，取上清，对上述缓冲液5000ml透析，换3次缓冲液，然后样品上样于用0.01M乙酸盐缓冲液平衡好的层析柱5.5×100cm中，用0-0.7MNaCL线性梯度洗脱，收集具有神经生长因子活性的蛋白峰，浓缩冻干，②CM-SpharoseFF层析将上述浓缩的样品，溶于20ml0.01M乙酸钠缓冲液PH5.8中，上样于用0.01M乙酸钠缓冲液PH5.8平衡好的层析柱2.6×50cm中，用0-1MNaCL线性梯度洗脱，收集具有神经生长因子活性的蛋白峰，浓缩冻干，③SephdexG75层析将上述CM-SpharoseFF层析下的样品，溶解在10ml10.01M乙酸钠缓冲液，PH5.8内含0.15MNaCL中，离心10000转，取上清，上样于用0.01M乙酸钠缓冲液，PH5.8，内含0.15MNaCL平衡好后的SephdexG75柱中，收集含有NGF活性的对称峰，经电泳及高效液相色谱证明为单一峰后，透析除盐，冻干即得半成品。 |
| 摘要 | 本发明涉及的是用蛇毒制备神经生长因子的工艺方法，在大量实验基础上，优选眼镜蛇毒，在10℃以下条件下操作，经CM-SepnadexC50、CM-SphatoseFF、SepndexG75三步层析，制成半成品，加入稳定剂白蛋白和冻干制品的赋形剂右旋糖苷，过滤分装，冻干制得。 |
| 国际公布 |
