公开(公告)号 | CN1463749A |
公开(公告)日 | 2003.12.31 |
申请(专利)号 | CN02121244.9 |
申请日期 | 2002.06.11 |
专利名称 | 抗咽喉炎特异性复合IgY及其制剂 |
主分类号 | A61K39/395 |
分类号 | A61K39/395;A61P11/04 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 雅臣药业集团(远东)有限公司 |
发明(设计)人 | 胡义结;杨荣鑑;包海威;包晟 |
地址 | 518001 广东省深圳市笋岗东路3002号万通大厦2218-2219室 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 |
代理人 | 张韬 |
国省代码 | 广东;44 |
主权项 | 一种抗咽喉炎复合IgY粗提物,其特征在于该IgY粗提物是由如下方法制备的:优选具高免疫应答能力的良种鸡:用A簇溶血性链菌制作抗原,分别免疫母鸡,每次注射1ml抗原在第一次注射后,每隔二周再强化注射一次,共三次;于第一次注射后第7个月,把这些鸡所产的蛋标记后分别提取其中的IgY,以ELISA法检测所制得的IgY的效价;再比较其效价,选出其中能制得IgY效价≥1∶128的免疫应答能力特别强的鸡只,再用这批鸡所产的蛋孵出优良鸡种,待其长大至2-3个月,作为本发明优选的高免疫应答能力的特种鸡;复合抗原的制备:选取A簇B型溶血性链球菌、肺炎双球菌、G簇溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌为咽喉炎和扁桃腺炎主要致病菌;购买市售以上五种主要致病菌菌株,用细菌培养基分别在三气培养箱中常规培养;将培养好的细菌按A簇B型溶血型链球菌占45-30%,肺炎双球菌占15-25%,G簇溶血性链球菌占10-15%,金黄色葡萄球菌占10-20%,白色葡萄球菌占20-10%的比例混合匀化;按1∶1的比例将福氏佐剂加入混合好的菌株混和体中搅拌均匀,制得乳状全菌复合抗原;将全菌复合抗原放入高速匀浆机中,高速粉碎匀化,制得全菌和菌体成份的复合抗原;分别对优选的特种鸡进行强化免疫:用所制取的复合抗原,采用皮下注射和翅静脉注射相结合的强化免疫法,分别对优选的特种鸡进行免疫,每只鸡每次注射量达到1-2ml抗原,相当于30-60亿个细菌;每隔二周再强化注射一次,一个月内共免疫三次;第一次免疫注射20天后,检取鸡所产免疫蛋;抗咽喉炎复合IgY粗提物的制备:用打蛋机将检取的免疫蛋打碎,用蛋黄筛筛滤去蛋清,留下蛋黄,搅拌均匀;测量所得的蛋黄的体积,按此体积的4-6倍加入蒸馏水,进行稀释并混合均匀;用NaOH溶液调整pH至5.5-6.0之间;将调整好pH值的稀释液进一步充分搅拌均匀,然后将其冷却至2-6℃,静置12小时-24小时;将稀释液加入高速离心分离机中,离心分离20分钟;将分离所得的上清再加入超滤器中进行超滤并浓缩10-20倍,按0.1~0.3%的比例将海藻酸钠加入浓缩后的浆料中,充分搅拌;再加入高速离心机中离心,取上清,去除脂蛋白;将离心分离后的浆料加入超滤机,过超微膜,进行过滤除菌;将过滤除菌后的产品用冷冻干燥机进行冷冻干燥,即制得抗咽喉炎复合IgY粗提物干粉成品。 |
摘要 | 本发明公开一种抗咽喉炎特异性复合IgY及其制备方法和制剂。本发明抗咽喉炎特异性复合IgY通过优选具高免疫应答能力的良种鸡,用全菌和菌体成份的复合抗原,分别对优选的特种鸡进行强化免疫,检取强化免疫鸡所产免疫蛋,制得抗咽喉炎复合IgY粗提物干粉成品,IgY粗提物进行纯化,即得纯IgY。用本发明IgY制备的抗咽喉炎口喷制剂无化学有害物质、天然安全并可直接喷服。 |
国际公布 |