| 公开(公告)号 | CN1439424A |
| 公开(公告)日 | 2003.09.03 |
| 申请(专利)号 | CN03108006.5 |
| 申请日期 | 2003.04.30 |
| 专利名称 | 抗非典病毒转移因子的制备方法 |
| 主分类号 | A61K38/02 |
| 分类号 | A61K38/02;A61K35/26;A61K35/28;A61K39/215;A61P31/14;C07K14/495;C07K14/435 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国人民解放军第四军医大学第一附属医院 |
| 发明(设计)人 | 许东亮;张国成 |
| 地址 | 710032陕西省西安市长乐西路15号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 西安通大专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 李郑建 |
| 国省代码 | 陕西;61 |
| 主权项 | 抗非典病毒转移因子制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)制备非典病毒抗原将从病人呼吸道分泌物中分离获得的非典病毒，接种于已长成单层的Hep-2细胞、人胚肾细胞、人胚肺细胞或鸡胚，37℃孵育，每天观察细胞病变情况，当CPE出现+++时或经病毒抗原检测阳性；收集细胞及上清，经病毒灭活后超声打碎，放冰箱冰冻保存；或按非典病毒基因序列用基因工程方法表达制备保护性抗原；2)以蔗糖沉层浓缩，以不连续梯度密度离心纯化病毒抗原将超声打碎的抗原5000rpm离心20min，弃去沉渣留上清，装入以15％、30％、45％及60％的蔗糖制备的不连续梯度密度离心管，超速离心，165000×g、3h，根据病毒的分子量确定该病毒所在离心管位置，吸出冰冻保存备用。3)用所提取的病毒抗原免疫动物挑选健康哺乳动物，取上述制备的病毒抗原免疫动物，共免疫5～6次，前两次分别以完全佛氏佐剂及不完全佛氏佐剂混合抗原，以高速组织匀浆机打匀，在动物皮内或皮下多点注射免疫，第3次以后在动物的肌肉或静脉注射，每次免疫间隔一周，最后一次免疫7天后取动物静脉血，以免疫荧光方法或ELISA方法检测上述病毒的特异性抗体效价，出现病毒特异性免疫效价后，宰杀动物，取脾及淋巴结节组织，低温冰冻保存备用；4)从免疫动物中提取抗非典病毒转移因子病毒免疫的动物脾及淋巴结组织，去其表面的筋膜、脂肪等组织，灭菌生理盐水反复冲洗，剪碎，经组织匀浆机高速粉碎，反复冻融4～6次，每次融化后均再以组织匀浆机高速匀浆粉碎，然后以超滤或透析的方法提取抗非典病毒转移因子。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种抗非典病毒转移因子制备方法，首先，非典病毒经Hep-2细胞、人胚肾细胞、人胚肺细胞或鸡胚培养增殖，制备非典病毒抗原以及根据非典病毒的基因序列用基因工程方法表达制备的保护性抗原。其次，以不连续梯度密度离心纯化病毒抗原，或以20％蔗糖沉层浓缩抗原。然后，用所提取的病毒抗原免疫动物。最后，从免疫动物中提取抗非典病毒转移因子。本发明的抗非典病毒转移因子药物通过增强呼吸道的免疫杀伤细胞特异性杀伤功能及调节粘膜免疫机制，能够起到预防及治疗上述病毒感染的作用，可以制备成注射液或滴鼻液药物，具有既可预防，又可治疗，标本兼治的特点。 |
| 国际公布 |
