公开(公告)号
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CN1117858C
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公开(公告)日
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2003.08.13
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申请(专利)号
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CN00103431.6
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申请日期
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2000.03.10
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专利名称
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乙型肝炎病毒核心基因和前S1区基因转染的小鼠靶细胞系及其应用
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主分类号
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C12N5/10
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分类号
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C12N5/10;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/63;C12N15/85
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国预防医学科学院病毒学研究所
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发明(设计)人
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赵阳青;詹美云
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地址
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100052北京市宣武区迎新街100号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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北京三高永信专利代理有限责任公司
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代理人
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姚宝琴
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国省代码
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北京;11
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主权项
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一种乙型肝炎病毒核心基因编码1-144aa基因和前S1基因编码1-42aa基因转染小鼠P815细胞后获得的靶细胞系P99-815,其特征是:乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因均来源于含双拷贝的首尾相连的HB V-DNA ayw亚型的质粒p THB V-1,乙型肝炎病毒核心基因片段和前S1基因片段是从已构建成功的原核表达载体p ET-11d CS1切下后,再与真核表达载体pC DNA 3构建成pC DNA 3 CS1质粒,再将该质粒转染小鼠肥大细胞瘤细胞P815,通过G418筛选获得表达外源基因的细胞系。
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摘要
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本发明属于分子生物学领域,涉及乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因转染而成的小鼠靶细胞系P99-815的建立,是乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因均来源于含双拷贝的首尾相连的HBV-DNA ayw亚型的质粒p THBV-1,乙型肝炎病毒核心基因片段和前S1基因片段是从已构建成功的原核表达载体p ET-11dCS1切下后,再与真核表达载体pC DNA3构建成pC DNA3CS1质粒,再将该质粒转染小鼠肥大细胞瘤细胞P815,要解决目的基因的分离、连接、克隆、鉴定、构建含目的基因的真核表达载体、转染真核细胞P815的技术,表达外源基因细胞的筛选、克隆、以及保存条件的研究等。该细胞系可以用于治疗和预防乙型肝炎药物的评价,对诱导小鼠体内细胞免疫水平检测时,用此细胞作为靶细胞。
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国际公布
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