| 公开(公告)号 | CN1428347A |
| 公开(公告)日 | 2003.07.09 |
| 申请(专利)号 | CN01136939.6 |
| 申请日期 | 2001.12.25 |
| 专利名称 | 赤魟肿瘤抑制基因的克隆、表达及生物活性 |
| 主分类号 | C07H21/04 |
| 分类号 | C07H21/04;C07K14/435;C12P19/34;C12P21/02;C12N15/64;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 北京博奥环宇生物技术有限公司 |
| 发明(设计)人 | 徐安龙;涂洪斌;熊茜 |
| 地址 | 100012北京市朝阳区亚运村惠忠北里312号天创世缘B2座1903室 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 龙淳 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种如序列表中序列号码1所示核苷酸序列的DNA。 |
| 摘要 | 本发明通过构建赤魟(Dasytis akajei)尾刺cDNA文库和DNA测序，并根据所获得的IPL肿瘤抑制基因EST 3’端和载体核苷酸序列，设计引物，用PCR的方法，从赤魟尾刺cDNA文库中筛选克隆到IPL全长基因。新基因长度为849bp，编码136个氨基酸的成熟肽(序列号码1)。所表达的蛋白质等电点为9.68，分子量约为15,690道尔顿。将赤魟尾刺IPL基因克隆于硫氧还蛋白基因融合表达载体pTRX的trxA基因3’末端，构建符合读码框的融合基因，该融合蛋白在大肠杆菌中以胞内部分可溶的形式存在，表达量可达40～60mg/l。通过Ni-Chelating亲和色谱层析，蛋白酶3C切割和凝胶过滤，得到纯度在95％以上成熟的重组赤魟肿瘤抑制蛋白，得率为5～8mg/l。该蛋白具有抑制选择性杀伤肿瘤细胞生长的活性。 |
| 国际公布 |
