公开(公告)号
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CN1839892A
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公开(公告)日
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2006.10.04
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申请(专利)号
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CN200610042181.X
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申请日期
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2006.01.13
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专利名称
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一种拟威克酵母变种抗肿瘤活性槐糖脂粗提物的制备方法
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主分类号
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A61K36/064(2006.01)I
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分类号
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A61K36/064(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C07H1/08(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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山东大学
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发明(设计)人
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宋 欣;曲音波;陈 静
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地址
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250100山东省济南市山大南路27号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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济南圣达专利商标事务所
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代理人
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郑华清
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国省代码
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山东;37
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主权项
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一种拟威克酵母变种(Wickerhamielladomercqiaevar.sophorolipid)抗肿瘤活性槐糖脂粗提物的制备方法,制备形式为:直接从拟威克酵母变种发酵全液中分离出抗肿瘤活性槐糖脂粗提物; 上述拟威克酵母变种抗肿瘤活性槐糖脂粗提物的制备方法由以下步骤组成: (1)自然沉降:取经液体发酵的拟威克酵母变种(Wickerhamielladomercqiaevar.sophorolipid)CGMCCNo.1576发酵全液,静置1~6小时,自然沉降,收集发酵液中的浅黄色粘稠物质;之后以4000~7000转/分钟将上述粘稠物质离心,收集沉淀部分; (2)乙酸乙酯萃取:将上述经离心得到的沉淀物中加入其体积量为3~10倍的乙酸乙酯,在25~37℃下,萃取2~8小时; (3)过滤:将上述乙酸乙酯萃取液在25~37℃下,用WhatmanNo.2滤纸过滤,收集滤渣; (4)洗涤:上述步骤(3)得到的滤渣用其体积量为3~10倍的乙酸乙酯在25~37℃下,洗涤2~4次; (5)减压蒸馏:洗涤完毕后收集滤渣,在温度50~70℃,压力0.2~0.8Kg/cm2,真空度为0.02~0.08Mpa的条件下进行减压蒸馏,将滤液中的乙酸乙酯蒸发去除; (6)收集物干燥:将上述收集的减压蒸馏残渣,在50~100℃,真空度0.02~0.08Mpa条件下,真空干燥12~24小时,制得固体槐糖脂粗提物; (7)槐糖脂乙醇溶液制备:将上述步骤(6)得到的槐糖脂固体配成浓度为20~100μg/mL槐糖脂乙醇溶液用于体外抑瘤试验。
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摘要
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本发明公开一种拟威克酵母变种(Wickerhamiella domercqiae var. sophorolipid)抗肿瘤活性槐糖脂粗提物的制备方法,该方法包括拟威克酵母变种发酵全液经过自然沉降、乙酸乙酯萃取、过滤、洗涤、减压蒸馏、收集物干燥和槐糖脂乙醇溶液制备等步骤。本发明的方法提取的拟威克酵母变种槐糖脂粗提物在125μg/mL浓度下对人肝癌细胞系H7402和肺腺癌细胞系A549具有完全的抑制作用,而对正常细胞没有不良作用,且该方法具有工艺简便、成本低的特点。
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国际公布
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