公开(公告)号
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CN1552857A
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公开(公告)日
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2004.12.08
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申请(专利)号
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CN200410005407.X
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申请日期
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2004.02.18
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专利名称
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酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺
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主分类号
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C12N15/13
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分类号
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C12N15/13;C12N1/19;C12N15/63;C12N15/81;C07K16/28;C12P21/02
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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北京天坛生物制品股份有限公司;天津博荟生物技术有限公司
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发明(设计)人
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马民强;汪和睦;周根喜;张德友
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地址
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100024中国北京市朝阳区三间房南里4号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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中原信达知识产权代理有限责任公司
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代理人
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丁业平;王维玉
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国省代码
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北京;11
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主权项
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一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法,其中所述的啤酒酵母工程菌株的受体菌是腺嘌呤、亮氨酸营养缺陷型的;所述的啤酒酵母工程菌包含重组2μ质粒但不含天然的2μ质粒;所述重组2μ质粒包含编码乙肝表面抗原的基因,该基因的5’端和3’端分别与3-磷酸甘油醛脱氢酶启动子和乙醇脱氢酶终止子可操作连接;所述重组2μ质粒还包含编码亮氨酸的基因,该基因的5’端和3’端分别与启动子和终止子可操作连接;该方法包括如下步骤:1)所述啤酒酵母工程菌的种子发酵步骤;2)利用步骤1)制得的种子进行发酵培养的步骤;和3)从步骤2)所得的发酵混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤;该方法的特征在于,在上述在步骤2)中以腺嘌呤的重量计,以低于14mg/升·小时的速率向培养基中流加腺嘌呤、腺苷、腺苷一磷酸、腺苷二磷酸或腺苷三磷酸。
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摘要
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本发明提供了一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的新方法,该方法包括如下步骤:1)所述啤酒酵母工程菌的种子发酵步骤;2)利用步骤1)制得的种子进行发酵培养的步骤;和3)从步骤2)所得的发酵混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤;该方法的特征在于,在上述在步骤2)中以腺嘌呤的重量计,以低于14mg/升·小时的速率向培养基中流加腺嘌呤、腺苷、腺苷一磷酸、腺苷二磷酸或腺苷三磷酸。本发明的方法可显著提高提高重组HBsAg表达水平。
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国际公布
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