公开(公告)号
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CN101028389A
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公开(公告)日
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2007.09.05
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申请(专利)号
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CN200710067535.0
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申请日期
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2007.03.07
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专利名称
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番红花球茎中具有抗肿瘤效果的有效活性成份的提取方法
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主分类号
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A61K36/88(2006.01)I
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分类号
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A61K36/88(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61K125/00(2006.01)N
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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浙江大学
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发明(设计)人
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王飞娟;朱 诚;潘薛波;赵 凯;高建青;陈文莉
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地址
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310000浙江省杭州市余杭塘路388号浙江大学生命科学学院
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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杭州天勤知识产权代理有限公司
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代理人
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胡红娟
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国省代码
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浙江;33
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主权项
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一种番红花球茎中具有抗肿瘤效果的有效活性成份的提取方法,包括如下步骤: (1)番红花球茎经清洗,用提取液研磨提取,所述的提取液是浓度为50mmol/L、PH值为8.0三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液,其中还含有浓度为1mmol/L的苯甲基磺酰氟、浓度为5mmol/L的二硫苏糖醇,番红花球茎的质量与提取液的体积比为1∶2; (2)将提取液离心分离得到上清液,取上清液加入NaCl固体,使NaCl的摩尔浓度为0.4mol/L;并二次离心去除杂质,得到去除杂质的上清液; (3)将去除杂质的上清液通过层析柱进行分离,上样10ml,层析后用90-120ml洗脱液A洗脱30min,洗脱出A组份,洗脱速度为2.0ml/min;再用100ml洗脱液B洗脱30min,洗脱出B组份,洗脱速度为2.0ml/min;洗脱液A是浓度为20mmol/L、PH值为8.0三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液,其中还含有浓度为0.4mol/L的NaCl,洗脱液B是浓度为20mmol/L、PH值为8.0三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液,其中还含有浓度为0.8mol/L的NaCl; (4)将步骤(3)得到B组份过滤脱盐、冷冻干燥后得白色粉末,用LC-304C-4高效液相色谱柱进行液相色谱分离,检测到保留时间为10.3-14.2min的物质即为具有抗肿瘤效果的有效活性物质有效活性成份,液相色谱分离条件为:流速1.0ml/min,采用波长214nm的UV检测器,流动相为乙腈和水的混合溶液。
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摘要
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本发明公开了一种番红花球茎中具有抗肿瘤效果的有效活性成份的提取方法,包括(1)番红花球茎经清洗,用提取液研磨提取;(2)将提取液离心分离得到上清液,取上清液加入NaCl固体并二次离心去除杂质,得到去除杂质的上清液;(3)将去除杂质的上清液通过层析柱进行分离,洗脱出B组份;(4)将步骤(3)得到B组份过滤脱盐、冷冻干燥后得白色粉末,用液相色谱分离,保留时间为10.3-14.2min的物质即为具有抗肿瘤效果的有效活性成份。本发明方法分离好,可适用于大量生产。
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国际公布
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