公开(公告)号
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CN100336907C
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公开(公告)日
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2007.09.12
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申请(专利)号
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CN200510094603.3
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申请日期
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2005.09.29
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专利名称
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重组人血小板生成素/干细胞因子融合蛋白及其制备
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主分类号
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C12N15/62(2006.01)I
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分类号
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C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/866(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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南京大学
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发明(设计)人
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秦浚川;臧宇辉;朱 洁;袁达文
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地址
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210093江苏省南京市汉口路22号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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南京知识律师事务所
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代理人
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高桂珍
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国省代码
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江苏;32
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主权项
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一种重组人血小板生成素/干细胞因子双功能融合蛋白基因,其特征是设计并构建一个人血小板生成素的1-157位氨基酸的编码区、16个氨基酸GGGGSPGGSGGGGSGG的连接肽编码区、可溶性人干细胞因子的1-145位氨基酸编码区和终止密码子依次首尾相连接的DNA片段,重组人血小板生成素/干细胞因子融合蛋白基因的核苷酸序列为: agcccggctcctcctgcttgtgacctccgagtcctcagtaaactacttcgtgactcccat60 gtccttcacagcagactgagccagtgcccagaggttcaccctttgcctacacctgtcctg120 ctgcctgctgtggactttagcttgggagaatggaaaacccagatggaggagaccaaggca180 caggacattctgggagcagtgacccttctgctggagggagtgatggcagcacggggacaa240 ctgggacccacttgcctctcatccctcctggggcaactttctggacaggtccgtctcctc300 cttggggccctgcagagcctccttggaacccagcttcctccacagggcaggaccacagct360 cacaaggatcccaatgccatcttcctgagcttccaacacctgctccgaggaaaggtgcgt420 ttcctgatgcttgtaggggggtcaacactatgtgtcaggcgggccccacccggaggagga480 ggttccccgggcggatccggaggaggaggctccggcggcgaagggatctgcaggaatcgt540 gtgactaataatgtaaaagacgtcactaaattggtggcaaatcttccaaaagactacatg600 ataaccctcaaatatgtccccgggatggatgttttgccaagtcattgttggataagcgag660 atggtagtacaattgtcagacagcttgactgatcttctggacaagttttcaaatatttct720 gaaggcttgagtaattattccatcatagacaaacttgtgaatatagtggatgaccttgtg780 gagtgcgtgaaagaaaactcatctaaggatctaaaaaaatcattcaagagcccagaaccc840 aggctctttactcctgaagaattctttagaatttttaatagatccattgatgccttcaag900 gactttgtagtggcatctgaaactagtgattgtgtggtttcttcaacattaagttagtaa960。
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摘要
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本发明属于生物技术中的基因工程制备多肽药物技术领域。其目的是构建一种血小板生成素/干细胞因子双功能融合蛋白基因,并在昆虫细胞中高效表达和制备生物活性更高、副作用更小的重组血小板生成素/干细胞因子双功能蛋白(rhTPO/SCF)。rhTPO/SCF基因为依次含有TPO的1-157位氨基酸编码序列、16个氨基酸的连接肽编码序列和SCF的1-145位氨基酸编码序列及终止密码子的DNA片段。从感染重组病毒的贴壁培养Sf9细胞中制备的rhTPO/SCF用于TF1细胞增殖实验,测定其比活为2.0×105units/mg;用于Mo7e细胞增殖实验,测定其比活为8.3×105units/mg。可用于治疗病人放疗、化疗及骨髓移植等病症引起的血小板低下。
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国际公布
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