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您现在的位置: 医学全在线 > 药学理论 > 中国药品专利文献 > 正文:高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法

公开(公告)号 CN1325638C  
公开(公告)日 2007.07.11  
申请(专利)号 CN200410075550.6  
申请日期 2004.12.21  
专利名称 高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法  
主分类号 C12N5/10(2006.01)I  
分类号 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 山东大学  
发明(设计)人 孙汶生;刘玉刚;张 秋;高立芬;石永玉;刘素侠;朱法良;郭 春  
地址 250061山东省济南市经十路73号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 济南圣达专利商标事务所  
代理人 郑华清  
国省代码 山东;37  
主权项 一种高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法,由以下步骤组成: (1)载体构建:载体pcDNA3经EcoR V线性化后用牛小肠碱性磷酸酶使其去磷酸化,重组克隆载体p3.6II经Pvu II酶切后获得1.1倍的HBV DNA,以T4 DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3;转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,经抗性筛选、酶切、测序鉴定重组质粒pcDNA3-HBV1.1; (2)将含有1.1倍HBV DNA的重组载体pcDNA3-HBV1.1利用尾静脉高压注射的方法导入动物体内,建立高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型; (3)模型鉴定。  
摘要 本发明公开了一种高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法,由以下步骤组成:(1)载体构建:载体pcDNA3经EcoR V线性化后用牛小肠碱性磷酸酶使其去磷酸化,重组克隆载体p3.6II经Pvu II酶切后获得1.1倍的HBV基因片段,以T4 DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3;转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,经抗性筛选、酶切、测序鉴定重组质粒;(2)将含有1.1倍HBV DNA的重组载体利用尾静脉高压注射的方法导入动物体内,建立高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型;(3)模型鉴定。本发明的方法制作过程简单易行,能广泛推广应用;制作过程时间短,对实验动物的损伤小,动物死亡率低;获得的模型能高水平的表达HBsAg,亦能较高水平的表达HBeAg。模型可作为乙肝治疗药物的筛选平台,用于HBV感染的基础研究和临床相关研究。  
国际公布  
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